[VIP第1年] 指数:3
本发明涉及植物**培养技术领域，特别涉及一种植物**培养基。背景技术：ms培养基于1962年由murashige和skoog设计，是目前植物**培养中应用**为***的培养基。据《危险化学品安全管理条例》(***令第591号)、《民用物品安全管理条例》及《易制爆危险化学品名录》(2017年版)可知，ms培养基的主要成分硝酸钾、硝酸铵均为易制爆管制试剂，随着**监管越发严格，所有易制爆试剂的购买、储存及使用变得越来越困难，尤其是兼有硝态氮和铵态氮的硝酸铵，其纯品被禁止市场流通，为植物**培养带来很大难度。b5培养基于1968年由gamborg等为培养大豆根细胞而设计，n6培养基于1974年由朱至清等为水稻等禾谷类作物花*培养而设计，两者均由ms培养基衍生而来，在有些植物**培养研究中***应用，虽然b5和n6培养基除了硝酸钾外不含其他易制爆成分，但两者中的钙离子和镁离子含量均大幅降低，且b5培养基中铵离子大幅减少、n6培养基中钾离子大幅增加，这些离子浓度的大幅波动对一些植物的**培养是不利的。cna草莓增殖培养基公开了一种无硝酸铵培养基，但其硝酸钾及**铵含量过高，*适用于草莓**培养；cna一种草莓**培养基及其配制方法公开了一种无硝酸铵培养基，在草莓**培养中取得很好的效果。使用减血清培养基能减少实验的变异性。西藏基础培养基常用知识
如何正确地使用培养基及**大程度地保持培养基的营养以维持细胞的生长，对每个培养者都很重要。培养基的使用依不同的培养基种类、培养方式、细胞种类的不同而存在差异。细胞培养液的构成细胞培养液指细胞生长的液体环境，一般指完全培养液，添加了血清、水解乳蛋白、各种添加剂等可以直接使用的培养液。细胞培养基&血清模式血清对于在传统培养基配方中生长和增殖的大多数细胞系来说是需要的，因为大多数单独的培养基并不能提供细胞生长所需要的全部营养，如MEM培养基，较为常用的量为5％～10％的比例，而特殊的低血清培养基血清量可降至3％左右，细胞的形态和功能不受影响。细胞培养基&乳欧液模式化学合成培养基现虽已大规模使用，但在某些培养领域水解乳蛋白仍在使用，以补充培养液中缺乏的氨基酸、小肽物质。较为常用的方式是用汉氏（Hanks’BSS）或欧式(Earle’sBSS)平衡液溶解水解乳蛋白（一般为5‰浓度），即成乳汉（欧）液，再与化学合成培养基（一般为MEM）按比例混合使用（如1：1）。细胞培养基&各类添加剂（生长因子等）模式成分复杂的培养基还含有许多化合物，包括蛋白质、多肽、核苷、柠檬酸循环的中间产物、**酸及脂类等。广西减血清培养基供应商DMEM培养基适用于多种类型的哺乳动物细胞。
第三节**的代谢与培养基新陈代谢(metabolism)足生物有机体基本的特征之一，是生命活动中一切生化反应的总称。它包括物质的分解和物质的合成过程。**吸收了外界的营养，在酶的作用下将其分解，再在酶的作用下台成**菌体的成分。分解与合成两个过程伴同发生，紧密相关，维持了**细胞的生命，进行**的生长。通过检测**系统及代谢产物的生理，来鉴定**的试验称生化试验。生化试验可分为糖代谢试验、蛋白质代谢试验、盐利用试验和呼吸酶类斌验4种。l.代谢试验①氧化发酵试验O-F；②糖（醇）类发酵试验；③VP和甲基红试验2.蛋白质代谢试验①蛋白水解试验；②硫化氢试验；③吲哚试验；④脱羧酶试验；③脱氨试验；⑥尿素酶试验。3.盐类代谢试验①枸橼酸盐试验；②丙二酸盐利用试验；③硝酸盐还原试验4．呼吸酶类试验①氧化酶试验；②细胞色素氧化酶试验表IMVIC试验对肠杆菌属的鉴别作用菌名吲哚（I）甲基红（M）VP（Vi）枸橼酸盐。
发酵培养基为：葡萄糖80g/l，酵母浸膏20g/l，k2hpo42g/l，mgso4·7h2o50mg/l，cecl30-40mg/l，mnso4·h2o3mg/l，feso4·7h2o3mg/l，vb110mg/l，生物素7μg/l；发酵工艺同实施例1，100l发酵罐中含有70l发酵培养基。设置cecl3的添加浓度为0，，如图1-2所示，随着cecl3添加量的增加，菌体浓度和谷氨酸含量均有所提升，当添加量为10mg/l时，菌体浓度和谷氨酸含量达到峰值，然后出现下降趋势，但是整个过程中，糖酸转化率没有明显改变（附图未显示）；说明cecl3稀土盐能够促进菌株增殖，提高谷氨酸相关合成酶的活力，提高谷氨酸的产量，但是过高的浓度会造成菌株增殖放缓和死亡，谷氨酸产量相应下降。二、通过上述实验确定cecl3添加量为10mg/l，在此基础上，研究2-羟基乙胺对菌体浓度、谷氨酸含量以及糖酸转化率的影响。设置2-羟基乙胺的浓度为，5,10,20,40,80,160mg/l，如图3-4所示，随着2-羟基乙胺添加量的增加，菌体浓度随之增加，相应地，谷氨酸含量和糖酸转化率也有所提升，当添加量为40mg/l时，菌体浓度和谷氨酸含量达到峰值，继续增加2-羟基乙胺的浓度，产生明显的抑菌效果，菌株密度下降明显；原因是，低浓度的2-羟基乙胺可能促进磷脂酰乙醇胺细胞壁组分的合成。使用减血清培养基能减少实验的误差和干扰。
实验组和对照组3选用发酵中期添加琥珀酸，此时，菌体增殖放缓，以产酸为主，琥珀酸对三羧酸循环有正向促进作用，而对乙醛酸循环途径起**作用，从而导致谷氨酸产量的增加；梯度试验发现，琥珀酸添加量过**于10g/l），并不会对谷氨酸产量带来进一步的提升，综合成本考虑，选择低于10g/l的添加量较为合适。对照组2和实验组在发酵中后期添加壳聚糖，能够改变细胞壁的通透性，促进谷氨酸分泌到胞外，从而提升谷氨酸产量和糖酸转化率；但是壳聚糖添加量（超过100mg/l）过大会导致抑菌现象发生，进而造成菌株死亡。虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，或在实施案例之外的树种实施本方法，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改，改进或范围的扩大，均属于本发明要求保护的范围。F12培养基适用于基因编辑和转染实验。广西减血清培养基供应商
MEM培养基含有多种必需的营养成分。西藏基础培养基常用知识
流加质量百分比浓度为20％的葡萄糖维持残糖不低于％，流加消泡剂消泡。实施例2一种优化的谷氨酸发酵培养基，其包括发酵培养基a和发酵培养基b；所述发酵培养基a首先添加，然后间隔24h添加发酵培养基b。所述发酵培养基a的制备方法为：取各原料：葡萄糖100g/l，酵母浸膏25g/l，k2hpo41g/l，mgso4·7h2o70mg/l，2-羟基乙胺20mg/l，cecl35mg/l，mnso4·h2o2mg/l，feso4·7h2o2mg/l，vb15mg/l，生物素5μg/l；将各原料搅拌均匀后，调节ph为，121℃**15min，自然冷却，制得发酵培养基a；所述发酵培养基b的制备方法为：取各原料：琥珀酸7g/l，尿素2g/l，壳聚糖50mg/l；将各原料搅拌均匀后，调节ph为，121℃**15min，自然冷却，制得发酵培养基b；采用常规发酵工艺：将黄色短杆菌gdk-9按8％接种量将种子液（od600nm为）接入装有60l发酵培养基a的100l发酵罐中进行发酵培养，发酵培养24h，然后添加10l发酵培养基b，继续发酵培养24h，收集发酵液；整个发酵培养过程中，控制发酵温度35℃，通风比1∶，搅拌转速300r/min，溶氧维持在20％，流加质量百分比浓度为20％的葡萄糖维持残糖不低于％，流加消泡剂消泡。实施例3一、cecl3稀土盐对菌体浓度、谷氨酸含量以及糖酸转化率的影响。西藏基础培养基常用知识
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