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一、为什么缓冲溶液可以维持PH值的稳定呢？其实这主要是因为缓冲溶液自身的成分和性能，它的成分里包含了酸、盐或碱，所以在一定程度上可以抵消外界加入酸性或碱性溶液带来的影响。二、配制缓冲溶液作用有哪些？1、缓冲溶液是分析检测实验中常会用到的溶液，实验中通常会要求溶液的pH值需要保持在一个规定的范围内，以保证指示剂的显色或变色，这些通过加入一定量的缓冲溶液就能达到目的。2、缓冲溶液在医学检验中也起着很重要的作用，主要是因为缓冲溶液可以保持机体正常血液PH范围，其中碳酸-碳酸氢钠是血液中主要的缓冲对，这与肺呼吸以及肾功能排泄息息相关。而机体正常新陈代谢后产生的CO2，会进入血液与水结合成碳酸,碳酸又与血浆中的碳酸氢根离子组成共轭酸碱对，所以缓冲溶液在医学上就有不可忽视的作用。PBS缓冲液的离子浓度与人体血液相似。江苏EBSS缓冲液常用知识
PBS 与 DPBSPBS 和 DPBS 都包括氯化钠和磷酸盐缓冲液，是生物学研究中常用的试剂，用于维持 pH 值，同时可大幅度地减少活细胞中的渗透压休克；然而，与 PBS 相比，DPBS 还包括氯化钾，配方中可含或不含钙和镁以及含或不含葡萄糖和**酸。根据您的具体应用选择 PBS 或 DPBS。
Dulbecco 的磷酸盐缓冲液（DPBS）DPBS 与 PBS 的不同之处在于它还包括氯化钾，并且提供多种配方。它也用于生物应用，水基缓冲液，包括氯化钠和磷酸盐缓冲液。
HBSS 与 EBSSHanks 的平衡盐溶液（HBSS）和 Earle 的平衡盐溶液（EBSS）都是等渗溶液，用于维持生物应用中的渗透压和 pH 值。虽然 HBSS 和 EBSS 包括葡萄糖和碳酸氢钠，用于短期维持生长培养基以外的细胞，但 EBSS 在 5% CO2 下使用，而 HBSS 包含较少的碳酸氢钠，可以在没有 CO2 的情况下使用。从各种依应用而定的配方中进行选择。 海南PBS缓冲液常见问题缓冲溶液是一种能够抵抗pH变化的溶液。
假设缓冲溶液里含有弱酸HA以及它的共轭碱。在溶液里发生的质子反应为：水合氢离子的浓度取决于弱酸与其共轭碱的浓度比。当加入少量强碱时，酸被中和，导致了氢氧根离子在溶液中很少累积，从而的浓度增加，的浓度减少。可以看到，虽然加入了强碱，但是溶液里的氢氧根离子变化很少，同时， 浓度较大，相对的变化小，两者比值几乎无变化，因此根据公式，水合氢离子的浓度变化很小。加入弱酸则是同样的道理。由于在 大浓度基数上的微小变化不会改变比值，也因此维持了体系内氢离子和氢氧根离子浓度的平衡。 [1]
所有操作均应在通风橱中进行，与苯酚接触过的皮肤部位应用大量水清洗，并用肥皂和水洗涤，忌用乙醇。3.苯酚平衡：因为在酸性pH条件下DNA分配于有机相，因此使用苯酚前必须对苯酚进行平衡使其pH值达到，苯酚平衡操作方法如下：①液化苯酚应贮存于-20℃，此时的苯酚呈结晶状态。从冰柜中取出的苯酚首先在室温下放置使其达到室温，然后在68℃水浴中使苯酚充分融解。②加入羟基喹啉（8-Quinolinol）至终浓度。该化合物是一种还原剂、RNA酶的不完全抑制剂及金属离子的弱螯合剂，同时因其呈黄色，有助于方便识别有机相。③加入等体积的1MTris-HCl（)，使用磁力搅拌器搅拌15分钟，静置使其充分分层后，除去上层水相。④重复操作步骤③。⑤加入等体积的MTris-HCl（)，使用磁力搅拌器搅拌15分钟，静置使其充分分层后，除去上层水相。⑥重复操作步骤⑤，稍微残留部分上层水相。⑦使用pH试纸确认有机相的pH值大于。⑧将苯酚置于棕色玻璃瓶中4℃避光保存。苯酚/氯仿/异戊醇(25:24:1)配制方法：1.说明：从核酸样品中除去蛋白质时常常使用苯酚/氯仿/异戊醇（25:24:1)。氯仿可使蛋白质变性并有助于液相与有机相的分离，而异戊醇则有助于消除抽提过程中出现的气泡。长时间或过量使用PBS缓冲液可能会对人体产生耐受性,导致恶心、呕吐、腹泻等症状。
该酶标IsC的工作浓度应为1／1?600。?????棋盘滴定法选择包被抗原工作浓度：①用包被液将抗原由1：50开始作比倍稀释后进行包被，洗涤。②将强阳性参考血清、弱阳性参考血清和阴性参考血清用稀释液作1：100稀释，加样，保温、洗涤。③加按工作浓度稀释的酶标IsC抗体，保温、洗涤。④加底物显色。加酸终止反应后读取A值。⑤选择强阳性参考血清的A值为0．8左右、阴性参考血清的A值小于0．1的包被抗的稀释度作为工作浓度，从中选取**适工作浓度。?1．2夹心法测抗原?????在夹心ELISA法中，可用棋盘滴定法同时选择包被抗体和酶标抗体的工作浓度。①抗体免*球蛋白用包被缓冲液稀释至蛋白浓度为10．0、1．0和0．1微克／毫升，分别在ELISA板上进行包被，每一浓度包括3个纵行，洗涤。②在1个横行各包被孔中加入强阳性抗原液，另1横行加入弱阳性抗原液，第3横行加入阴性对照液，保温、洗涤。③将酶标抗体用稀释液稀释成3个浓度，例如1：1?000、1：5?000和1：25000。分别加入每个包被浓度的1个纵行中，保温、洗涤。④加底物显色。加酸终止反应后，读取A值。⑤以强阳性抗原的A值在0．8左右、阴性参考的A值小于0．1的条件作**适条件，据此选择包被抗体和酶抗体的工作浓度。一般情况下,磷酸盐缓冲液对人体无害,其不但能增加食品的口感,还能够促进人体对钙的吸收。新疆HBSS缓冲液价格信息
每种缓冲体系所占的分量在各类细胞中是不同的.江苏EBSS缓冲液常用知识
1:50～l:800)后，按行进行包被、洗涤。按列分别加入用稀释液1:100稀释的强阳性、弱阳性、阴性参考血清及稀释液(作空白对照)，保温，洗涤。加工作浓度酶标抗体，洗涤，加底物显色，加酸终止反应后读取A值。选择强阳性参考血清A值；为0．8左右，阴性参考血清A值<0．1的包被抗原稀释度为工作浓度。?方阵(棋盘)法选择包被抗体和酶标抗体的工作浓度将抗体用包被液稀释为10mg／L、lmg／L、／L三个浓度按行包被，每一个浓度包被三行(每行3孔)，分别在每个浓度包被的***、二、三行中分别加入强阳性抗原，弱阳性抗原和阴性对照，将酶标抗抗体用稀释液稀释为1:l000、l:5000、l:10000三个浓度，分别加入每个浓度包被的***、二、三列中。加底物显色，加酸终止反应，分别读取A值。以强阳性抗原液A值在，阴性参考A值<**适条件。据此选择包被抗体和酶标抗体的**佳工作浓度。?二、ELISA**适工作浓度的选择及标准化操作1**适工作浓度的选择?1．1间接法测抗体?????酶标抗体工作浓度的选择：①用IgG进行包被，洗涤。②将酶标IgG用稀释液作一系列稀释后分别加入已包被的孔中，保温、洗涤。③加酸终止反应后，读取吸光度(A)。读取A值在1．0时的酶标抗体稀释度，作为酶标抗体的工作浓度。江苏EBSS缓冲液常用知识
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