[VIP第1年] 指数:3
3)拟南芥叶片愈伤**的诱导方法：用手术剪刀剪开长势良好的无菌叶片，用镊子将其取出摆放在步骤(1)的诱导培养基中，使伤口接触培养基；于温度23-25℃、湿度50-70％、光照强度1500-2500lux、光照和黑暗交替(光照时间16h、黑暗时间8h)条件下培养。(4)拟南芥根愈伤**的诱导方法：用镊子取出无菌苗的根，用手术剪刀剪开后平铺于步骤(2)的诱导培养基中，培养条件同步骤(3)。(5)cs诱导培养基的诱导结果为：拟南芥叶片愈伤**诱导时，培养6-8d在切口处出现颗粒状愈伤**，培养24-26d获得嫩绿色致密的团块状愈伤**，颗粒状愈伤**诱导率及愈伤**总诱导率均为100％；拟南芥根愈伤**诱导时，培养5-7d在切口处开始出现少量颗粒状愈伤**，培养20-22d获得较大体积的淡黄色松脆型愈伤**，且在愈伤**周围观察到大量致密分布的白毛，颗粒状愈伤**诱导率及愈伤**总诱导率均为100％。如图5所示。对比培养例5：将cs基本培养基替换为ms基本培养基，其余完全同培养实例5，ms基本培养基的成分及用量如表1所示。ms诱导培养基的诱导结果为：拟南芥叶片愈伤**诱导时，培养7-10d在切口处出现颗粒状愈伤**，培养24-26d获得嫩绿色致密的团块状愈伤**，颗粒状愈伤**诱导率及愈伤**总诱导率均为100％。F12培养基在细胞分化研究中表现优越。吉林减血清培养基哪家好
所描述的实施例**是本申请一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本申请中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都应当属于本发明保护的范围。实施例1一种优化的谷氨酸发酵培养基，其包括发酵培养基a和发酵培养基b；所述发酵培养基a首先添加，然后间隔24h添加发酵培养基b。所述发酵培养基a的制备方法为：取各原料：葡萄糖80g/l，酵母浸膏20g/l，k2hpo42g/l，mgso4·7h2o50mg/l，2-羟基乙胺40mg/l，cecl310mg/l，mnso4·h2o3mg/l，feso4·7h2o3mg/l，vb110mg/l，生物素7μg/l；将各原料搅拌均匀后，调节ph为，121℃**15min，自然冷却，制得发酵培养基a；所述发酵培养基b的制备方法为：取各原料：琥珀酸5g/l，尿素2g/l，壳聚糖80mg/l；将各原料搅拌均匀后，调节ph为，121℃**15min，自然冷却，制得发酵培养基b；采用常规发酵工艺：将黄色短杆菌gdk-9按8％接种量将种子液（od600nm为）接入装有60l发酵培养基a的100l发酵罐中进行发酵培养，发酵培养24h，然后添加10l发酵培养基b，继续发酵培养24h，收集发酵液；整个发酵培养过程中，控制发酵温度35℃，通风比1∶，搅拌转速300r/min，溶氧维持在20％。山东减血清培养基牌子MEM培养基提供了细胞生长所需的基本营养成分。
此法由巴斯德创立，用于酒类消毒而得名。目前用于牛乳消毒。方法有两种：一种为℃加热15秒，另一种为63-66℃加热30分钟。大多采用第一种方法。(2)煮沸法。在1个大气压下，水煮沸后温度达100℃，煮沸5分钟后可杀死一般**繁殖体。如于水中加入2%碳酸钠，可将其沸点提高至105℃，既可促进芽胞的杀灭，又可防止金属器皿生锈。(3)流通蒸气消毒法。又称常压蒸气消毒法，常用附诺(Amold)流通蒸气**器，利用1个大气压下100℃水蒸气进行消毒，10-30分钟后**繁殖体被杀死，但对芽孢作用不大。(4)间歇**法（fractionalsterilization）。采用间歇方式达到**目的。将**物品置于阿诺流通蒸气**器内，100℃加热15-30分钟，每日1次，连续3次。每次**后取出物品置37℃孵育箱过夜，致残存的芽胞发育成繁殖体，次日再通过流通蒸气**器加热而被杀灭。如此反复，既可杀灭芽胞，又可使不耐高温的物质免受影响。若某些物质不耐100摄氏度，则可将温度下降至75-80℃，每次加热时间延长到30-60分钟，常用血清凝固器对吕氏血清培养基和L-J培养基的**属此方法。(5)高压蒸气火菌法。利用密闭的耐高压蒸气**器(autoclave)，在蒸气不外溢的条件下，使锅内压力增高，随之蒸气温度也增高。通常在℃。
3)培养方法：将配制的1/2cs生长培养基分装于长、宽、高9cm的耐高温培养盒中，用移液枪吸取带有无菌水的无菌种子，吹打在无菌滤纸上，用无菌尖头镊子将种子均匀点播在培养基上；于温度22-24℃、湿度50-70％、光照强度1500-2000lux、光照和黑暗交替(光照时间16h、黑暗时间8h)条件下培养。(4)1/2cs生长培养基的培养结果为：哥伦比亚型拟南芥种子在1/2cs生长培养基上的萌发率为100％，培养16d的幼苗，表现为植株健壮，莲座叶均已伸展，叶色浓绿，根系发达、平均主根长为。如图1所示。对比培养例1：将1/2cs基本培养基替换为1/2ms基本培养基，其余完全同培养实例1，1/2ms基本培养基的成分及用量如表1所示。1/2ms生长培养基的培养结果为：哥伦比亚型拟南芥种子在1/2ms生长培养基上的萌发率为100％，培养16d的幼苗，表现为植株健壮，莲座叶部分伸展，叶色浓绿，根系发达、平均主根长为。如图1所示。培养实例1和对比培养例1的培养结果比较：哥伦比亚型拟南芥在1/2cs生长培养基和1/2ms生长培养基上的萌发率均为100％；在相同条件下培养16d时，与1/2ms生长培养基相比，1/2cs生长培养基中的幼苗长势更佳，主要表现为莲座叶长势更好、根系更为发达。如图1所示。无血清培养基适用于敏感细胞系的培养和研究。
三)、试验结果：初代培养：使用本发明的消毒方法，消毒成功率能达到80％，诱导培养基萌芽率能达到90％，可以成功建立无菌再生体系。继代培养：使用本发明的增殖培养基，绣球组培苗增殖倍率能够达到8～10倍，组培苗高度一致，生长健壮。生根培养：使用本发明的生根培养基，绣球组培苗生根率能够达到95％，根系发达，健壮，可以成功用于移栽大棚。本发明所指ms培养基是murashige和skoog研制的培养基，其成分配方表见表1。1/2ms培养基是指大量元素含量为ms培养基的一半，其他成分用量相同。表1、ms培养基成分表本发明涉及的植物生长调节剂有：6-ba—6-苄氨基嘌呤；ga3—赤霉素；iba—吲哚丁酸，naa—萘乙酸。本发明中的诱导培养基、增殖培养基和生根培养基均为液体培养基。本具体实施方式的实施例均为本发明的较佳实施例，并非依此限制本发明的保护范围，故：凡依本发明的结构、形状、原理所做的等效变化，均应涵盖于本发明的保护范围之内。F12培养基确保了实验结果的一致性和可靠性。山东减血清培养基牌子
MEM培养基在细胞生物学研究中的基础培养基之一。吉林减血清培养基哪家好
一般情况下应调pH比所需值低～，因过滤**后，pH值会升高约。8）在细胞培养过程中，建议不加或加少量的***，如血清的浓度较低则所加***的量也要相应降低一些。9）建议用1NHCl或1NNaOH来调节培养基的pH，因为用碳酸氢钠来调对培养液的渗透压影响比较大。如下图所示：图6-1MEM培养基（SLM，MD611）在pH值相同情况下所加的碳酸氢钠、氢氧化钠的量及所对应的培养液渗透压图6-2199培养基（MD502）在pH值相同情况下所加的碳酸氢钠、氢氧化钠的量及所对应的培养液渗透压培养基**培养基的**方法主要有两种，高压**及um微孔滤膜过滤**。与过滤相比，高压**的工作强度小，相对便宜，失败率低，但易造成营养成分的流失。高压**某些培养基（如MEM）可进行高压**，例如清大天一的MEM培养基中的MD605、MD609等。其中不含有L-谷氨酰胺和碳酸氢钠，可在高压**后加入。另外可高压的谷氨酸盐（如L-丙氨酰-L-谷氨酰胺）可代替L-谷氨酰胺。为保证高压**的效果，**设备的验证很关键，可高压**的培养基在121℃、15psi，15分钟的条件下完全可达到**效果及营养成分的**小损失，因此不需将**时间延长。过滤**大多数培养基采用～μm孔径的微孔滤膜进行过滤**，并且已成为培养基**的发展方向。吉林减血清培养基哪家好
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