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细胞传代消化时所用胰酶的浓度越高是越好 贴壁细胞的消化： 常用的消化方法主要有酶消化法、离子螯合剂、物理法和冷冻法。其中**常用的是酶消化法。酶消化法：贴壁干细胞酶消化传代时通常采用两种方式：1、加入胰酶等干细胞脱落后，再加培养基中止胰酶作用，离心传代；2、加入胰酶后，镜下观察待干细胞开始脱落时，弃去胰酶，加入培养液并分瓶。但前者太麻烦，而后者有可能对干细胞施加胰酶选择，因为总是贴壁不牢的干细胞先脱落。细胞培养中胰酶的作用一般是分解脂肪等。上海进口胰酶哪家便宜
胰酶消化细胞的原理胰酶消化细胞是一种用来分解细胞质和细胞间物质的化学过程它可以被看成一种简单的动力学过程，它将细胞结合部分的物质分解为其他物质，然后这些留下的物质可以用来维持细胞的高能量水平这种过程通过将脂肪、蛋白质、糖类和其它物质分解为小的离子或者原子小分子的方式来发生。胰酶是细胞分解与吸收物质的一种关键分子，通常有四种类型，它们是肽酶，脂水解酶，载脂蛋白酶和糖水解酶，分别可以将蛋白质、脂肪、脂蛋白和糖类物质分解为更小的离子和分子，以便细胞可以更好地吸收物质，维持其自身的正常功能和形态。上海进口胰酶哪家便宜胰酶细胞消化液(Trypsin-EDTA Solution)含0.25%胰酶和0.02%EDTA。
0.25%胰酶是细胞生物学中常用的一种生物试剂，下面汇总一下胰酶使用过程中常见的一些问题。
胰酶的使用浓度是多少？胰酶浓度：常用0.25%胰酶+0.02%EDTA作为消化液。
胰酶的保存胰酶可在-20℃下保存一年。随着时间延长，胰酶的消化能力减弱。胰酶可分装冻存，在使用前从-20℃冰箱取出。尽量避免在4℃长期保存。胰酶使用的时候要注意什么？（1）在使用胰酶细胞消化液的过程中要特别注意避免消化液被细菌污染。（2）胰酶细胞消化液消化细胞时间不宜过长，否则细胞铺板后生长状况会较差。
胰酶细胞消化液(Trypsin-EDTASolution)含0.25%胰酶（Trypsin）、0.02%EDTA和酚红,不含Ca2＋和Mg2＋。该消化液已用0.22μm滤膜过滤除菌,可以直接用于培养细胞的消化,或者一些组织的消化。本胰酶细胞消化液具有方便快速的特点,通常室温消化1分钟左右就可以消化下大多数贴壁细胞。使用说明：贴壁细胞的消化：1、吸去培养液,用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。2、加入少量胰酶细胞消化液（含酚红）,略盖过细胞即可,室温放置30秒至2分钟。不同的细胞消化时间有所不同。3、显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化,或者用***吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来；此时吸除胰酶细胞消化液；加入含血清的完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。4、如果发现消化不足,则加入胰酶细胞消化液重新消化。5、如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落,直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g离心1分钟,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。淡黄色的胰酶溶液能放心使用吗？
胰蛋白酶（Trypsin）简称胰酶，是一种丝氨酸水解酶，能把多肽链中赖氨酸和精氨酸残基中的羧基端切断。在组织细胞的提取、培养，以及体外细胞培养过程中，均会使用到胰蛋白酶消化液，用于水解细胞间蛋白质，使组织或细胞离散成单个细胞。胰酶在37℃pH8.0条件下消化能力**强。常用胰酶工作浓度为0.25%。EDTA可以螯合钙镁离子，胰酶溶液中搭配EDTA使用可以加速细胞间连接蛋白的水解，起到增强消化的效果。酚红是一种pH指示剂，溶液偏碱性时呈紫红色，偏酸性时呈橘红色，近中性时呈粉红色。本产品为0.25%胰蛋白酶消化液，含0.25%胰蛋白酶，溶于Hank’s缓冲液，不含EDTA，无酚红指示剂，经0.22μm过滤除菌。在消化酶中，胰酶主要用于促进消化。江西进口胰酶生产企业
胰蛋白酶是一种胰丝氨酸肽链内切酶，作用于多肽链中赖氨酸和精氨酸残基中的羧基侧。上海进口胰酶哪家便宜
冰冻保存，但不得反复冻融。供试品溶液的制备取本品适量，精密称定，加。测定法取底物溶液、（pH）1ml，混匀，作为空白。取供试品溶液（预热至25℃±℃），立即计时并摇匀，使比色池内的温度保持在25℃±℃，照紫外－可见分光光度法（2010年版*典二部附录ⅣA），在237nm的波长处，每隔30秒读取吸光度，共5分钟，每30秒钟吸光度的变化率应恒定，且恒定时间不得少于3分钟。以吸光度为纵坐标，时间为横坐标，作图，取在3分钟内成直线部分的吸光度，按下式计算。式中P为每2500胰蛋白酶单位中含糜蛋白酶的量，单位；A2为直线上开始的吸光度；A1为直线上终止的吸光度；T为A2至A1读数的时间，分；W为测定液中含供试品的量，mg;，吸光度每分钟改变，即相当于1个糜蛋白酶单位。每2500单位胰蛋白酶中不得多于50单位的糜蛋白酶。干燥失重取本品适量，以五氧化二磷为干燥剂，在60℃减压干燥4小时，减失重量不得过（2010年版*典二部附录ⅧL）。胰蛋白酶效价测定底物溶液的制备取N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯盐酸盐，加水溶解使成100ml，作为底物原液；取10ml，用磷酸盐缓冲液（取，pH值为）稀释成100ml，照紫外－可见分光光度法（2010年版*典二部附录ⅣA），恒温于℃±℃，以水作空白。上海进口胰酶哪家便宜
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