参与细胞的代谢活动。此外,通过提供钠,K+和Ca2+,帮助细胞调节细胞膜功能。Na+是细胞外液中**主要的阳离子,对维持渗透压的恒定有决定性的作用,还与Cl-共同参与生物电活动、维持水平衡和酸碱平衡等。K+主要分布在细胞内液,对于***某些酶是必需的,并在调节细胞内环境的酸碱平衡上也有极重要意义。Ca2+和Mg2+主要参与信号传导、能量代谢、脂肪酸合成、核糖体稳定和蛋白质合成等多种生理作用。PO43-、SO42-、HCO3-是基质所需阴离子,同时是细胞内电荷的调节者。磷对于细胞的生长、代谢和调控都有重要的作用,含磷的化合物如核酸、磷脂、蛋白质是构成细胞的主要成分,ATP、ADP是能量生成、存储和利用的不可或缺的化合物。上述离子对于细胞的作用各有不同,它们共同构成了细胞赖以生存的渗透压、pH和电化学平衡的微环境,细胞对于某种元素的吸收利用会受到其它元素的干扰,例如培养基中过高的钙离子浓度会使镁和锌的吸收利用受到干扰。因此,在保证培养基中上述离子浓度满足要求以外,还需保证上述离子之间种类和比例的平衡。此外,微量元素如铁、钴、镍、硒、碘、铜、锌、锰、铬、钼、氟等对于细胞生长代谢和产物合成都有促进作用。F12培养基在细胞分化和基因表达研究中有重要应用。吉林减血清培养基哪家好
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**早开发的基础培养基(minimalessentialmedium,MEM),其本质为含有盐、氨基酸、维生素和其他必需营养物的pH缓冲的等渗混合物。在此基础上,DMEM、IMDM、HAMF12、PRMI1640等各种合成细胞培养基被不断开发出来。常用合成培养基的配方此处不详细介绍,其特性及应用的范围见表1-2。表1-2常用合成培养基的特性及应用的范围培养基名称特性及应用范围199细胞培养基添加适量的血清后,可***用于多种细胞培养,并用于**学、*苗生产等。MEM细胞培养基MEM(MinimalEssentialMedium)培养基有含Earle's平衡盐的类型,也有含Hanks'平衡盐的类型;有高压**型的,也有过滤**型的;还有含非必需氨基酸的类型。是**基本、适用范围**广的细胞培养基。DMEM细胞培养基DMEM(Dulbecco’smodifiedMinimalEssentialMedium)是由Dulbecco在MEM培养基的基础上改良获得的,各成分份量加倍,分低糖(1000mg/L)、高糖(4500mg/L)两种类型。细胞生长快。附着稍差的肿*细胞、克隆培养用高糖效果较好,常用于杂交*的骨髓*细胞和DNA转染的转化细胞培养。IMDM细胞培养基IMDM(Iscove’smodifiedDMEM)是由Iscove在DMEM基础上改良,增加了几种氨基酸和胱氨酸量等。可用于杂交*细胞培养。
愈伤**诱导率为100%。如图6所示。对比培养例6:将cs基本培养基替换为ms基本培养基,其余完全同培养实例6,ms基本培养基的成分及用量如表1所示。ms诱导培养基的诱导结果为:本氏***叶片愈伤**诱导时,培养15-18d的叶片略微增厚,在叶片四周产生较少的淡绿色愈伤**,愈伤**诱导率为90%,在愈伤**团块上产生的嫩绿色不定芽数量较少;本氏***根愈伤**诱导时,培养9-11d在切口处产生大量淡黄色致密的愈伤**,愈伤**诱导率为100%。如图6所示。培养实例6和对比培养例6的诱导结果比较:用上述方法进行本氏***叶片愈伤**诱导时,cs诱导培养基愈伤**诱导率为100%,而ms诱导培养基的诱导率*为90%,在所述相同培养条件下,与ms诱导培养基相比,cs诱导培养基可更快诱导出大量致密的叶片愈伤**、产生更多的不定芽;用上述方法进行本氏***根愈伤**诱导时,cs诱导培养基与ms诱导培养基诱导出的根愈伤**形态相近,两种培养基的根愈伤**诱导率均为100%。如图6所示。培养实例7:水稻成熟胚愈伤**诱导(1)水稻种子消毒及筛选:a、选种:以籼稻缙恢10号为例,将水稻种子晾晒干燥后于4℃下长期保存,挑选籽粒饱满、大小基本一致的水稻种子,用剪刀从种子中部剪开,去除谷壳。F12培养基适用于多种类型的细胞培养实验。
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培养实例2和对比培养例2的培养结果比较:兰兹贝格型拟南芥种子在1/2cs生长培养基和1/2ms生长培养基上的萌发率均为100%;在相同条件下培养28d时,与1/2ms生长培养基相比,1/2cs生长培养基中的幼苗长势更佳,在平均株高、莲座叶大小、根长、花朵数量等方面均优于1/2ms生长培养基;并且,采用上述培养方法,不论是1/2cs生长培养基还是1/2ms生长培养基,均能获得形态完整的花粉,且花粉活力高达%,其特点在于选择了兰兹贝格型拟南芥作为培养对象,且选择了高度适中的培养盒进行培养,克服了传统培养方法无法获得拟南芥整个生育期无菌苗的缺点,所获无菌花***可直接用于花*离体培养等研究内容。如图2所示。培养实例3:油菜无菌苗培养与培养实例1不同的地方在于:步骤(1)所用种子为中双11号油菜种子,其余完全同培养实例1。1/2cs生长培养基的培养结果为:中双11号油菜种子在1/2cs生长培养基上的萌发率为100%,培养9d的幼苗,表现为植株健壮、平均株高为,叶色浓绿,茎秆粗壮、平均茎中粗为,根系发达、平均根数为(>)、平均主根长为。如图3所示。对比培养例3:将1/2cs基本培养基替换为1/2ms基本培养基,其余完全同培养实例3,1/2ms基本培养基的成分及用量如表1所示。无血清培养基提供了无血清的纯净环境。福建RPMI1640培养基答疑解惑
RPMI1640培养基能够维持细胞的代谢活性。吉林减血清培养基哪家好
1.细胞培养基的种类按照细胞培养基的发展历史,细胞培养基大致可分为平衡盐溶液、天然细胞培养基、合成细胞培养基、无血清细胞培养基、限定化学成分细胞培养基等几大种类。(balancedsaltsolution,BSS)BSS主要是由无机盐、葡萄糖组成,它的作用是维持细胞渗透压平衡,保持pH稳定及提供简单的营养。其主要用于细胞的漂洗、配制其他试剂等。几种常用的BSS配方如下(表1-1)。D-Hank's与Hank's的一个主要区别是前者不含有Ca2+和Mg2+,因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因为Ca2+、Mg2+是细胞膜的重要组成成份,参与细胞粘附等功能,使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免细胞结团。此外,Hanks液和Earle液是常用的BSS基础溶液,前者缓冲能力较弱,适合于密闭培养;后者缓冲能力较强,适合于5%CO2的培养条件。表1-1几种常用的BSS配方(g/L)天然培养基指来自动物体液或利用**分离提取的一类培养基,如血浆、血清、***、鸡胚浸出液等。其***是营养成分丰富,培养效果良好,但缺点是成分复杂,来源受限且制作过程复杂、批间差异大。目前***使用的天然培养基是血清,另外各种**提取液、促进细胞贴壁的胶原类物质在培养某些特殊细胞也是必不可少。吉林减血清培养基哪家好
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