3.高温高压**后,4℃保存。SolutionI(质粒提取用)组份浓度:25mMTris-HCl(),10mMEDTA,50mMGlucose配制量:1L配制方法:1.量取下列溶液,置于1L烧杯中。2.高温高压**后,4℃保存。3.使用前每50ml的SolutionI中加入2ml的RNaseA(20mg/ml)。SolutionII(质粒提取用)组份浓度:200mMNaOH,1%(W/V)SDS配制量:500ml配制方法:1.量取下列溶液,置于500ml烧杯中10%SD50ml2NNaOH50ml2.加**水定容至500ml,充分混匀3.室温保存,此溶液保存时间比较好不要超过一个月注意:SDS易产生气泡,不要剧烈搅拌SolutionIII(质粒提取用)组份浓度:3MKOAc,5MCH3COOH配制量:500ml配制方法:1.称量下列试剂,置于500ml烧杯中。2.加入300ml去离子水后搅拌溶解。3.加去离子水将溶液定容至500ml。4.高温高压**后,4℃保存。MEDTA()组份浓度:MEDTA配制量:1L配制方法:1.称取gNa2EDTA·2H2O,置于1L烧杯中。2.加入约800ml的去离子水,充分搅拌。3.用NaOH调节pH值至(约20gNaOH)。注意:pH值至,EDTA才能完全溶解。4.加去离子水将溶液定容至1L。5.适量分成小份后,高温高压**。6.室温保存。1MDTT组份浓度:1MDTT配制量:20ml配制方法:1.称取gDTT,加入到50ml塑料离心管内。2.加20ml的MNaOAc()。生化实验室常常用的缓冲系主要有磷酸、柠檬酸、碳酸、醋酸、巴比妥酸、Tiris(三羟甲基氨基甲烷)等系统。浙江HBSS缓冲液联系方式
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在前面提到,将等式同时取对数,并简化就可以得到: 或者这就是Henderson-Hasselbalch方程。值得注意的是,式子中酸及其共轭碱的浓度都是平衡时的浓度,除了酸性过于强的情况下,由于同离子效应的存在,一般都可用此式计算,根据此式可得出下列几点结论:1 缓冲液的pH值与该酸的电离平衡常数Ka及盐和酸的浓度有关。弱酸的pKa值衡定,但酸和盐的比例不同时,就会得到不同的pH值。酸和盐浓度相等时,溶液的pH值与PKa值相同。2 酸和盐浓度等比例增减时,溶液的pH值不变。3 酸和盐浓度相等时,缓冲液的缓冲效率为比较高,比例相差越大,缓冲效率越低,缓冲液的一般有效缓冲范围为pH=pKa±1,pOH=pKb±1。 [1]陕西EBSS缓冲液常见问题每种缓冲体系所占的分量在各类细胞中是不同的.
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PBS缓冲液,是生物化学研究中使用**为***的一种缓冲液,主要成分为Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和KCl,一般作为溶剂,起溶解保护试剂的作用。由于Na2HPO4和KH2PO4有二级解离,缓冲的pH值范围很广,而NaCl和KCl主要作用为增加盐离子浓度。如有需要PBS还可以补加1 mmol/L CaCl2和0.5 mmol/L MgCl2,以提供二价阳离子。
配制方法播报称取8.0g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4、0.24g KH2PO4溶于800mL蒸馏水中,用HCl调节溶液至7.4,***加蒸馏水定容至1L即可得0.01M PBS缓冲液。作用播报PBS是磷酸缓冲盐溶液的简称,不仅伪狂犬病毒要用它稀释,一般的有活性的生物制剂都要用它来稀释。原因就是它具有盐平衡、可调整的适宜pH缓冲作用,蒸馏水不具有盐平衡作用,可以破坏生物蛋白的结构及生物特性;生理盐水不具有调整pH的作用,对完整的、具有活性的物质不能保证其在**适条件下参与生物反应,所以使用PBS是优先。在细胞培养中,它通常用于洗涤传代培养中的细胞,以及在计数细胞时作为稀释溶液。 [2]PBS也不是***的,有的生物活性物质需要的条件比PBS还要高,就需要在平衡缓冲液中加入更多的成分,维持比较好的条件保证生物活性物质保持其**完整的特性 [1]。
磷酸盐缓冲液取磷酸二氢钠,与磷酸氢二钠。磷酸盐缓冲液()甲液:取磷酸,加水至1000ml,摇匀。乙液:取磷酸氢二钠,加水使溶解成1000ml。取上述甲液,摇匀,即得。磷酸盐缓冲液()取磷酸二氢钾100g,加水800ml,用盐酸调节pH至。磷酸盐缓冲液()取,即得。磷酸盐缓冲液()取磷酸二氢钾,即得。磷酸盐缓冲液()取磷酸二氢钾,用水稀释至100ml,即得。磷酸盐缓冲液()取磷酸二氢钠、磷酸氢二钠,加水使溶解成400ml,即得。磷酸盐缓冲液(含胰酶)()取磷酸二氢钾;另取胰酶10g,加水适量使溶解,将两液混合后,加水稀释至1000ml,即得。磷酸盐缓冲液()取,加,用水稀释至1000ml,摇匀,即得。磷酸盐缓冲液()取磷酸二氢钾,加,用水稀释至100ml,即得。磷酸盐缓冲液()取,加新沸过的冷水稀释至200ml,摇匀,即得。磷酸盐缓冲液()取磷酸氢二钠,调节pH值至,即得。磷酸盐缓冲液()取磷酸二氢钾,加,用水稀释至200ml,即得。磷酸盐缓冲液()取磷酸二氢钾,加水使溶解成1000ml,取50ml,加,再加水稀释至200ml,即得。磷酸盐缓冲液()甲液:取磷酸氢二钠,加水溶解,并稀释至500ml。乙液:取磷酸二氢钠,加水溶解,并稀释至100ml。取上述甲液,摇匀,即得。磷酸盐缓冲液(~)取磷酸氢二钾。PBS缓冲液是一种常用的缓冲剂,用于调节pH值和保持溶液的稳定性。
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PBS溶液又称磷酸盐缓冲溶液,一般选择Na2HPO4和KH2PO4配制,因为钠盐溶解的较慢。根据不同pH的溶液,称量不同质量的磷酸盐,也可以用pH计调溶液的pH。PBS一般用作支持电解质。
配置方法播报编辑采用去离子水、KH2PO4和Na2HPO4·2H2O配制PBS溶液,按以下步骤进行:(1) 配制1/15mol/L KH2PO4,即每升水中溶解9.078克KH2PO4;(2) 配制1/15mol/LNa2HPO4·2H2O,即每升水中溶解11.876克Na2HPO4·2H2O;(3) 将18.2%(体积分数)KH2PO4溶液和81.8%Na2HPO4·2H2O混合; PBS缓冲液的pH值为7.2-7.4,与人体血液等渗,可以维持实验体系的pH值稳定。上海HBSS缓冲液价格查询
使用pH计可以更准确地测量pH值的变化,判断是否为缓冲溶液。浙江HBSS缓冲液联系方式
在缓冲溶液中加入少量强酸或强碱,其溶液pH值变化不大,但若加入酸,碱的量多时,缓冲溶液就失去了它的缓冲作用。这说明它的缓冲能力是有一定限度的。缓冲溶液的缓冲能力与组成缓冲溶液的组分浓度有关。0.1mol.L-1HAc和0.1mol.L-1NaAc组成的缓冲溶液,比0.01mol.L-1HAc和0.01mol.L-1NaAc的缓冲溶液缓冲能力大。关于这一点通过计算便可证实。但缓冲溶液组分的浓度不能太大,否则,不能忽视离子间的作用。组成缓冲溶液的两组分的比值不为1∶1时,缓冲作用减小,缓冲能力降低,当c(盐)/c(酸)为1∶1时△pH**小,缓冲能力大。不论对于酸或碱都有较大的缓冲作用。缓冲溶液的pH值可用下式计算:此时缓冲能力大。缓冲组分的比值离1∶1愈远,缓冲能力愈小,甚至不能起缓冲作用。对于任何缓冲体系,存在有效缓冲范围,这个范围大致在pKaφ(或pKbφ)两侧各一个pH单位之内。弱酸及其盐(弱酸及其共轭碱)体系pH=pKaφ±1弱碱及其盐(弱碱及其共轭酸)体系pOH=pKbφ±1例如HAc的pKaφ为4.76,所以用HAc和NaAc适宜于配制pH为3.76~5.76的缓冲溶液,在这个范围内有较大的缓冲作用。配制pH=4.76的缓冲溶液时缓冲能力比较大,此时(c(HAc)/c(NaAc)=1。浙江HBSS缓冲液联系方式
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