缓冲液认识作用(二)同时,我们人体的正常生理环境的维持离不开缓冲溶液,认识学习缓冲溶液有利于我们深入认识人体复杂化学反应的机制。缓冲溶液对维持着人体正常的血液p H范围。其中碳酸-碳酸氢钠是血浆中**主要的缓冲对,此对缓冲机制与肺的呼吸功能及肾的排泄和重吸收功能密切相关。正常人体代谢产生的二氧化碳进入血液后与水结合成碳酸,碳酸与血浆中的碳酸氢根离子—组成共轭酸碱对,所以缓冲溶液在医学检验中有着重要的意义。 [4]在生化实验或研究工作中要慎重地选择缓冲体系,因为有时影响实验结果的因素并不是缓冲液的pH值。宁夏DPBS缓冲液
在前面提到,将等式同时取对数,并简化就可以得到: 或者这就是Henderson-Hasselbalch方程。值得注意的是,式子中酸及其共轭碱的浓度都是平衡时的浓度,除了酸性过于强的情况下,由于同离子效应的存在,一般都可用此式计算,根据此式可得出下列几点结论:1 缓冲液的pH值与该酸的电离平衡常数Ka及盐和酸的浓度有关。弱酸的pKa值衡定,但酸和盐的比例不同时,就会得到不同的pH值。酸和盐浓度相等时,溶液的pH值与PKa值相同。2 酸和盐浓度等比例增减时,溶液的pH值不变。3 酸和盐浓度相等时,缓冲液的缓冲效率为比较高,比例相差越大,缓冲效率越低,缓冲液的一般有效缓冲范围为pH=pKa±1,pOH=pKb±1。 [1]西藏DPBS缓冲液采购通过选择合适的缓冲液可以确保酶在条件下进行催化反应。
三、缓冲液使用中的注意事项在实际工作中有些分析人员由于不大了解缓冲溶液的作用机理,当所配制和使用的缓冲溶液与规定的数值不相符时,为使缓冲溶液达到要求,就用盐酸或氢氧化钠等强酸、强碱进行调节,以为这样做可以使缓冲溶液尽快达到所需要的pH值,然而,结果却适得其反,这样的溶液pH值虽然调对了,可是它的缓冲体系却被破坏了,作用也就失去了,缓冲溶液一般都是由弱酸及其弱酸盐或是弱碱及其弱碱盐组成的一对共轭体。使用缓冲溶液的注意事项:不少缓冲溶液都含有易挥发组分,如,氨-氯化铵中的氨酷酸-醋酸钠中的醋酸。现在,不少实验室引入了定量加液器,用定量加液器加试剂,具有简便准确误差恒定的特点,特别是在做成批样品时更显出它的优越性,不少同志也喜欢用它来加缓冲液,但是,应注意缓冲液不能长久存放在定量加液器中,因该器皿不密闭,易造成氨的挥发(醋酸-醋酸钠缓冲液中的醋酸也同理),从而,导致溶液失效,正确的做法是缓冲液应适量配制,使用后及时密闭并置于低温中保存。
只要知道缓冲对的PH值,和要配制的缓冲液的pH值(及要求的缓冲液总浓度),就能按公式计算[盐]和[酸]的量。这个算法涉及对数换算,较麻烦,前人为减少后人的计算麻烦,已为我们总结出pH值与缓冲液对离子用量的关系并列出了表格。只要我们知道要配制的缓冲液的pH,经查表便可计算出所用缓冲剂的比例和用量。例如配制100nm pH5.8浓度为0.1M磷酸缓冲液。经查表知pH5.8浓度为0.2M Na2HPO48.0毫升(1M=1 mol/L),而0.2M Na2HPO492.0毫升。依此可推论出配制100ml 0.1M的磷酸缓冲液需要0.1M Na2HPO48.0毫升,而0.1M Na2HPO4需要92.0毫升。计算好后,按计算结果准确称好固态化学成分,放于烧杯中,加少量蒸馏水溶解,转移入100ml容量瓶,加蒸馏水至刻度,摇匀,就能得到所需的缓冲液。各种缓冲溶液的配制,均按表格按比例混合,某些试剂,必须标定配成准确浓度才能进行,如醋酸、氢氧化钠等。另外,所有缓冲溶剂的配制计量都能从以上的算式准确获得。 [2]如果加入的酸或碱量过多,缓冲溶液的缓冲能力会降低,pH值会发生变化。
pbs缓冲液的配制配方是10X的PBS母液,然后再对其母液进行1:10稀释即可获得PBS缓冲液。PBS是磷酸盐缓冲液(PhosphateBufferSaline),是生物学实验室**常用的缓冲液之一。其主要成分包括:氯化钠(NaCl)、氯化钾(KCl)、磷酸氢二钠(Na2HPO4)和磷酸二氢钾(KH2PO4)。配制步骤:清洗干净所需烧杯、转子和量筒,向一个烧杯装少量去离子水(约100ml)并放入一个转子后放在称量天平旁备用;向另一个烧杯装约800ml去离子水并在微波炉或者水浴锅(65°以上均可)中加热。注意:由于实验室所购买的Na2HPO4常常带有二水、七水或者十二水,与之对应的重量分别为1.78g、2.68g、3.58g。向烧杯中加入预热的去离子水,烧杯放置在磁力搅拌器上搅拌溶解。用量筒定容到1L,保存备用。取100ml10X的PBS母液,加入900ml去离子水即可获得pH=7.4的PBS缓冲液(无需用pH计校准PH值)。PBS缓冲液可以用于分子克隆和细胞培养等实验。西藏DPBS缓冲液采购
缓冲溶液是无机化学及分析化学中的重要概念。宁夏DPBS缓冲液
磷酸盐缓冲液取磷酸二氢钠,与磷酸氢二钠。磷酸盐缓冲液()甲液:取磷酸,加水至1000ml,摇匀。乙液:取磷酸氢二钠,加水使溶解成1000ml。取上述甲液,摇匀,即得。磷酸盐缓冲液()取磷酸二氢钾100g,加水800ml,用盐酸调节pH至。磷酸盐缓冲液()取,即得。磷酸盐缓冲液()取磷酸二氢钾,即得。磷酸盐缓冲液()取磷酸二氢钾,用水稀释至100ml,即得。磷酸盐缓冲液()取磷酸二氢钠、磷酸氢二钠,加水使溶解成400ml,即得。磷酸盐缓冲液(含胰酶)()取磷酸二氢钾;另取胰酶10g,加水适量使溶解,将两液混合后,加水稀释至1000ml,即得。磷酸盐缓冲液()取,加,用水稀释至1000ml,摇匀,即得。磷酸盐缓冲液()取磷酸二氢钾,加,用水稀释至100ml,即得。磷酸盐缓冲液()取,加新沸过的冷水稀释至200ml,摇匀,即得。磷酸盐缓冲液()取磷酸氢二钠,调节pH值至,即得。磷酸盐缓冲液()取磷酸二氢钾,加,用水稀释至200ml,即得。磷酸盐缓冲液()取磷酸二氢钾,加水使溶解成1000ml,取50ml,加,再加水稀释至200ml,即得。磷酸盐缓冲液()甲液:取磷酸氢二钠,加水溶解,并稀释至500ml。乙液:取磷酸二氢钠,加水溶解,并稀释至100ml。取上述甲液,摇匀,即得。磷酸盐缓冲液(~)取磷酸氢二钾。宁夏DPBS缓冲液
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