(四)PBS液可配成含0.85%NaCl,pH7.2的PBS(简称pH7.2PBS)。1.PBS贮存液(10×)配法NaCl8.5gKCl0.2gNa2HP04·12H202.85g(或Na2HP04·2H201.13g)KH2P040.27g溶于100ml双蒸水中。2.PBS应用液配法取贮存液50ml加双蒸水450m1即成,经103kPa(121.3℃)15分钟灭菌,置室温或4℃保存备用。除上述三种常用的平衡盐溶液外,尚有其他几种次常用的平衡盐溶液,如低钙镁的Dul-becc。液和无钙镁的D-Hanks液(或CMF-Hanks)等。可用于配制消化液和洗涤细胞(可防止抑制酶活性和致细胞凝聚等)。其成分见表1-5,配制方法可参照上述几种平衡盐溶液的方法进行。细胞培养缓冲液——PBS/DPBS。内蒙古有酚红平衡盐溶液供应商
平衡盐溶液配方比例平衡盐溶液的定义、用途和重要性12平衡盐溶液(BalancedSaltSolution,BSS)是一种电解质含量与血浆内含量相仿的盐溶液,用于维持细胞渗透压平衡,保持pH稳定及提供简单的营养。它广泛应用于医学、生物学研究和临床***中,特别是在重度缺水或休克状态下,使用平衡盐溶液可以避免输入过多的氯离子,减少高氯性酸中毒的风险。具体配方乳酸钠和复方氯化钠溶液:1/3的。碳酸氢钠和等渗盐水溶液:1/3的。PBS(磷酸盐缓冲液):,调节pH至。DPBS(无钙镁磷酸盐缓冲液):与PBS相似,但不含有钙镁离子。HEPES缓冲液:,调节pH至。配置步骤准备材料:准备好干净的瓶子、纯水和所需的各种化学试剂。称量试剂:根据配方称量各种试剂。溶解试剂:将称量的试剂加入纯水中,搅拌至完全溶解。调节pH值:使用氢氧化钠或盐酸将溶液的pH值调节至所需范围(如PBS的pH值为)。定容和过滤:将溶液定容至所需体积,并进行高温高压灭菌或通过μm滤膜过滤除菌。储存:将配制好的溶液冷却后,密封保存于4℃冰箱中备用。 江西HBSS平衡盐溶液报价细胞学实验中必不可少的试剂就是平衡盐溶液。
**常用的平衡盐溶液是乳酸钠林格氏液。这种溶液是一种含有乳酸盐、不含重碳酸盐的等渗电解质溶液,其电解质浓度、pH、渗透压等与细胞外液非常接近,因此被称为平衡盐液。乳酸钠林格氏液对防治低血容量休克有重要生理作用,已被***用于替代失去的细胞外液,或作为代血浆的溶媒而增加其***价值,并可防止弥散性血管内凝血(DIC)以防止休克。1平衡盐溶液的主要作用是维持细胞渗透压平衡,保持pH稳定及提供简单的营养。它们主要由无机盐、葡萄糖组成。常用的平衡盐溶液包括乳酸钠和复方氯化钠溶液(1/6M乳酸钠溶液1/3加复方氯化钠溶液2/3)以及碳酸氢钠和等渗盐水溶液()。23在医学领域,平衡盐液的应用非常***,不仅用于***缺水状态,避免输入过多的氯离子,还能有助于纠正酸中毒,而且在手术、烧伤、重症监护等情况下都有重要的应用价值。
(二)Hanks平衡盐溶液(Hanksbalancedsaltsolutions,HBSS)为了便于保存和减少有关成分的化学反应,此液可配成20倍浓缩液(20×),10倍浓缩液(10×)和5倍浓缩液(5×)的储存液(母液)。现以l0×为例,将其配制方法介绍如下:×母液配制法甲液:取450ml三蒸水依次溶解下列试剂NaCl80gKCl4gMgS04·(含2H20者)待完全溶解后,补足三蒸水至500m1。乙液:取450m1三蒸水依次溶解下列试剂(含12H2O者),补足三蒸水至500ml。、乙液等量用三蒸水稀释10倍,即成使用液。用前高压灭菌。例如配制1000m1Hanks使用液,则取三蒸水900ml加入甲液50m1、乙液50m1混匀,用(115℃)高压灭菌15分钟。临用时,用。3.无钙镁Hanks(calciumandmagnesiumfreeHanksbufferedsaline,CMF-Hanks)液,也称D-Hanks液。D-Hanks与Hanks液的一个主要区别是前者不含钙和镁,常用于配制胰蛋白酶等溶液;而Hanks液*含,不能用于5%C02的环境,若放于C02孵箱中,溶液将迅速变酸,使用时应注意D-Hanks与Hanks液的这些区别。【附】:为配制上述Hanks液,应先配好。配制方法如下:称取,置玻璃研钵中细研,逐渐加入,要记好加NaOH的量,共加至,将研好的酚磺酞液用吸管移入烧瓶中加三蒸水(113℃)高压灭菌15分钟。 平衡盐溶液PBS缓冲液常用于组织块的漂洗、细胞的洗涤、细胞或组织的运输。
细胞培养常用水和平衡盐溶液的配制方法:水是细胞赖以生存的主要环境,营养物质和代谢产物都必须溶解在水中,才能为细胞吸收和排泄。而且,水溶液对维持细胞形态、进行生物化学反应、温度传导、调节渗透压和酸碱度的平衡都有着重要作用。体外培养细胞对水的质量很敏感,要求很高。水的纯度不够,即使混杂有一些含量极微的有害元素,有时也会对细胞产生不利的影响,甚至引起细胞中毒死亡。因此,配制培养液的水必须经过纯化。细胞培养实验室需要纯净的水,常可分为离子交换水和蒸馏水两种。前者由于仍然带有非离子物质和有机物,在组织培养中很少使用。组织培养必须使用玻璃蒸馏器制备的三次蒸馏水;二次蒸馏水或外购的金属蒸馏器制的蒸馏水只能用于清洗器皿,蒸馏水的储存对保持水的质量有很大影响;周围环境和空气能使水污染或改变其pH,所以储存水的容器要尽量减少启开的次数,避免和外界过多接触,存放时间不宜太长,一般不要超过两周,**好现制现用。二、平衡盐溶液(balancedsaltsolution,BSS),主要由无机盐和葡萄糖组成。BSS中的无机离子不仅是细胞生命所需成分,而且在维持渗透压、缓冲和调节溶液的酸碱度方面,起着重要作用。 平衡盐溶液能够提供相对稳定的离子环境和pH 缓冲能力。贵州EBSS平衡盐溶液哪个好
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D-PBS、HBSS、EBSS的区别Q:D-PBS与PBS的区别?A:DPBS和PBS成分是一样的,区别在于DPBS的Na2HPO4与KH2PO4的添加量略小于PBS。DPBS主要用于胚胎学方面的研究,可作为胚胎、组织、细胞的漂洗液、冻存液和培养液。Q:HBSS和PBS/DPBS有什么区别?A:相比较而言,HBSS缓冲液中盐成分较PBS和DPBS更复杂,且有葡萄糖,可为细胞提供简单的营养,而PBS和DPBS中只有磷酸根,钠,钾,氯离子,只是**简单的盐平衡缓冲液,不能为细胞提供暂时的营养。Q:EBSS和HBSS有什么区别?A:HBSS和EBSS是多数培养基的基础溶液,两者的主要区别是缓冲能力不同。HBSS的NaHCO3含量较低(),其缓冲能力较弱,一般用空气平衡,即利用空气中的CO2使溶液pH值平衡。EBSS含有高浓度的NaHCO3(),其缓冲能力较强,溶液pH值需在5%的CO2培养箱中才能达到平衡。如果希望在CO2培养箱中保存组织,需要用EBSS。如果**是清洗将要在细胞培养基中储存的组织,用HBSS液就可以了。 内蒙古有酚红平衡盐溶液供应商
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