为什么缓冲溶液的ph值在4.75~7.25之间?
缓冲溶液的缓冲范围在PKa±16531=4.75±1之间。水合氢离子的浓度取决于弱酸与其共扼碱的浓度比。当加入少量强碱时,酸被中和,导致了氢氧根离子在溶液中很少累积。从而C(A一)的浓度增加,C(HA)的浓度减少。可以看到,虽然加入了强碱,但是溶液里的氢氧根离子变化很少,同时,浓度较大,相对的变化小,两者比值几乎无变化,因此根据公式,水合氢离子的浓度变化很小。所以缓冲溶液的ph值在4.75~7.25 为了避免PBS缓冲液对人体的负面影响,建议使用时遵循正确的使用方法和容器规格,避免长时间或过量使用。中国澳门有酚红缓冲液产品介绍

1:50~l:800)后,按行进行包被、洗涤。按列分别加入用稀释液1:100稀释的强阳性、弱阳性、阴性参考血清及稀释液(作空白对照),保温,洗涤。加工作浓度酶标抗体,洗涤,加底物显色,加酸终止反应后读取A值。选择强阳性参考血清A值;为0.8左右,阴性参考血清A值<0.1的包被抗原稀释度为工作浓度。?方阵(棋盘)法选择包被抗体和酶标抗体的工作浓度将抗体用包被液稀释为10mg/L、lmg/L、/L三个浓度按行包被,每一个浓度包被三行(每行3孔),分别在每个浓度包被的***、二、三行中分别加入强阳性抗原,弱阳性抗原和阴性对照,将酶标抗抗体用稀释液稀释为1:l000、l:5000、l:10000三个浓度,分别加入每个浓度包被的***、二、三列中。加底物显色,加酸终止反应,分别读取A值。以强阳性抗原液A值在,阴性参考A值<**适条件。据此选择包被抗体和酶标抗体的**佳工作浓度。?二、ELISA**适工作浓度的选择及标准化操作1**适工作浓度的选择?1.1间接法测抗体?????酶标抗体工作浓度的选择:①用IgG进行包被,洗涤。②将酶标IgG用稀释液作一系列稀释后分别加入已包被的孔中,保温、洗涤。③加酸终止反应后,读取吸光度(A)。读取A值在1.0时的酶标抗体稀释度,作为酶标抗体的工作浓度。中国台湾DPBS缓冲液技术指导酶活性实验中缓冲液的作用。

法兰10沿圆周方向排列开设有固定孔18,固定孔18位于密封垫圈二19的外侧,通过密封垫圈二19起到密封的作用;顶盖9:顶盖9置于法兰10的上表面,顶盖9上表面边沿的通孔内沿圆周方向排列设有固定螺栓6,固定螺栓6的底端穿过固定孔18延伸至法兰10的下表面,固定螺栓6的底端设有螺母5,顶盖9上表面的一侧设有进液管7,进液管7的底端与筒体3的内腔连通,进液管7的顶端设有密封盖8,通过密封盖8对进液管7进行密封,顶盖9下表面的中部设有搅拌单元17,搅拌单元17包括伺服电机171、搅拌轴172和叶片173,搅拌轴172通过轴承转动连接在顶盖9下表面的中部,叶片173阵列设在搅拌轴172的圆周面,伺服电机171固定在顶盖9的上表面,伺服电机171的输出轴与搅拌轴172的顶端固定连接,伺服电机171的输入端与plc控制器2的输出端电连接,通过伺服电机171的转动,带动搅拌轴172和叶片173的转动,可以对筒体内的液体进行搅拌;出液斗11:出液斗11设在固定座1的底部,出液斗11的顶端与筒体3的内腔连通,出液斗11的底端设有出液管13,出液管13上对应设有电磁阀12,通过出液斗11和出液管13将液体排出,通过电磁阀12控制出液管13的开闭;其中:还包括plc控制器2,plc控制器2设在固定座1的上表面。
1MTris-HCl(,,)组份浓度:1MTris-HCl配制量:1L配制方法:1.称量gTris置于1L烧杯中。2.加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解。3.按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。4.将溶液定容至1L。5.高温高压**后,室温保存。注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低。10&timeTEBuffer(,,)组份浓度:100mMTris-HCl,10mMEDTA配制量:1L配制方法:1.量取下列溶液,置于1L烧杯中。2.向烧杯中加入约800ml的去离子水,均匀混合。3.将溶液定容至1L后,高温高压**。4.室温保存。MTris-HCl()组份浓度:MTris-HCl配制量:1L配制方法:1.称量gTris置于1L烧杯中。2.加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解。3.用浓盐酸调节pH值至。4.将溶液定容至1L。5.高温高压**后,室温保存。注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低。3M醋酸钠()组份浓度:3M醋酸钠配制量:100ml配制方法:1.称量NaAc·3H2O置于100-200ml烧杯中,加入月40ml的去离子水搅拌溶解2.加入冰醋酸调节pH值至3.加去离子水将溶液定容至100ml4高温高压**后,室温保存。在进行pH计校准时,首先需要选择合适的pH缓冲溶液。
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在前面提到,将等式同时取对数,并简化就可以得到: 或者这就是Henderson-Hasselbalch方程。值得注意的是,式子中酸及其共轭碱的浓度都是平衡时的浓度,除了酸性过于强的情况下,由于同离子效应的存在,一般都可用此式计算,根据此式可得出下列几点结论:1 缓冲液的pH值与该酸的电离平衡常数Ka及盐和酸的浓度有关。弱酸的pKa值衡定,但酸和盐的比例不同时,就会得到不同的pH值。酸和盐浓度相等时,溶液的pH值与PKa值相同。2 酸和盐浓度等比例增减时,溶液的pH值不变。3 酸和盐浓度相等时,缓冲液的缓冲效率为比较高,比例相差越大,缓冲效率越低,缓冲液的一般有效缓冲范围为pH=pKa±1,pOH=pKb±1。 [1]缓冲液是一种能在加入少量酸或碱时抵抗pH改变的溶液。中国台湾DPBS缓冲液技术指导
PBS缓冲液中的磷酸盐和盐水可以维持实验体系的离子强度稳定。中国澳门有酚红缓冲液产品介绍
生物缓冲液pH计校正及使用方法
生物缓冲液在实验分析中经常被用到,它的作用是稳定溶液的pH值。然而,很多人在实验中会遇到无法调节缓冲液pH值的情况,这是为什么呢?如何解决这个问题呢?下面我将详细介绍。首先,从目前使用的pH计来看,国产的pH计或酸度计,校正缓冲液时需要注意以下两种情况:
1、购买市场上配置好的标准溶液,在聚乙烯瓶中密封储存。如果在室温条件下保存1-2个月后,若出现浑浊、沉淀或发霉等情况,就不能继续使用了。已经使用过的校正缓冲液也不能再倒回去使用。2、购买缓冲剂并自己配置。大部分厂家生产的缓冲剂都是干燥型的pH缓冲剂,使用时需要将其溶解在之前煮沸15-30分钟的去离子水中,然后倒入250ml容量瓶中,稀释至刻度,充分摇匀即可。 中国澳门有酚红缓冲液产品介绍
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