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缓冲液的作用和使用注意事项
一、缓冲液的概念缓冲液（Buffersolution）通常是由弱酸及其共轭碱或弱碱及其共轭酸缓冲对所组成的溶液，能够在加入一定量其他物质时减缓pH的改变。以生物实验中**常用的一种缓冲液PBS为例，是由Na2HPO4、KH2PO4组成的缓冲对，在PH5.8-8.0范围内有较强的缓冲能力。二、缓冲液的作用缓冲溶液的作用是在有限的范围内调整溶液的pH值，使待测溶液的酸度符合分析方法所规定的范围。例如，苯酚在碱性介质及铁**钾存在下，可与4-氨基安替比林反应生成橙红色的安替比林染料，为了防止芳香胺类的干扰以pH在10士0.2时**为适宜。为此，就需要在待测溶液中加入氨一氯化钱缓冲溶液调整和控制待测溶液的pH为10.0士0.2。 多种细胞只能在很小的PH范围内活动，需要有缓冲体系来维持整个过程不受干扰。中国台湾DPBS缓冲液技术指导
常用作缓冲溶液的酸类由弱酸及其共轭酸盐组合成的溶液具有缓冲作用。常见的缓冲体系有：1、弱酸和它的盐（如HAc---NaAc）2、弱碱和它的盐（NH3·H2O---NH4Cl）3、多元弱酸的酸式盐及其对应的次级盐（如NaH2PO4---Na2HPO4）的水溶液组成。而生化实验室常用的缓冲系主要有磷酸、柠檬酸、碳酸、醋酸、巴比妥酸、Tris（三羟甲基氨基甲烷）等系统，生化实验或研究工作中要慎重地选择缓冲体系，因为有时影响实验结果的因素并不是缓冲液的pH值，而是缓冲液中的某种离子。如硼酸盐、柠檬酸盐、磷酸盐和三羟甲基甲烷等缓冲剂都可能产生不需要的化学反应。硼酸盐：硼酸盐与许多化合物形成复盐、如蔗糖。柠檬酸盐：柠檬酸盐离子容易与钙结合，所以存在有钙离子的情况下不能使用。磷酸盐：在有些实验，它是酶的抑止剂或甚至是一个代谢物，重金属易以磷酸盐的形式从溶液中沉淀出来。而且它在。三羟甲基氨基甲烷：它可以和重金属一起作用，但在有些系统中也起抑制作用。其主要缺点时温度效应。这点往往被忽视，在室温pH是，4℃时是，37℃时是，因此，4℃配制的缓冲液在37℃进行测量时，其氢离子浓度就增加了10倍。在，其缓冲能力极为不理想。 江苏EBSS缓冲液常用知识在进行pH计校准时,首先需要选择合适的pH缓冲溶液。
测定PBS液的PH值约为。磷酸盐缓冲液取磷酸二氢钠，与磷酸氢二钠。磷酸盐缓冲液()甲液:取磷酸，加水至1000ml，摇匀。乙液：取磷酸氢二钠，加水使溶解成1000ml。取上述甲液，摇匀，即得。磷酸盐缓冲液()取磷酸二氢钾100g，加水800ml，用盐酸调节pH至。磷酸盐缓冲液()取，即得。磷酸盐缓冲液()取磷酸二氢钾，即得。磷酸盐缓冲液()取磷酸二氢钾，用水稀释至100ml，即得。磷酸盐缓冲液()取磷酸二氢钠、磷酸氢二钠，加水使溶解成400ml，即得。磷酸盐缓冲液(含胰酶)()取磷酸二氢钾；另取胰酶10g，加水适量使溶解，将两液混合后,加水稀释至1000ml，即得。磷酸盐缓冲液()取，加，用水稀释至1000ml，摇匀，即得。磷酸盐缓冲液()取磷酸二氢钾，加，用水稀释至100ml，即得。磷酸盐缓冲液()取，加新沸过的冷水稀释至200ml，摇匀，即得。磷酸盐缓冲液()取磷酸氢二钠，调节pH值至，即得。磷酸盐缓冲液()取磷酸二氢钾，加，用水稀释至200ml，即得。磷酸盐缓冲液()取磷酸二氢钾，加水使溶解成1000ml，取50ml，加，再加水稀释至200ml，即得。磷酸盐缓冲液()甲液：取磷酸氢二钠，加水溶解，并稀释至500ml。乙液：取磷酸二氢钠，加水溶解，并稀释至100ml。取上述甲液，摇匀，即得。磷酸盐缓冲液。
ph缓冲液的三个值
PH缓冲液的三个值指的是pH4、pH7和pH9。12PH缓冲液是一种能够维持溶液pH值相对稳定的化学物质，常用于科学实验和工业生产中。PH缓冲液的主要作用是抵抗外界酸碱物质的影响，保持溶液的pH值稳定。PH缓冲液的选择和使用对于确保实验结果的准确性和产品的质量至关重要。在科学实验中，PH缓冲液常用于校准pH计，确保测量的准确性。通过使用不同pH值的缓冲液进行校准，可以确保pH计在测量不同pH值的溶液时能够准确反映真实的pH值。此外，PH缓冲液还在生物化学、环境监测、食品工业等多个领域中发挥着重要作用。选择合适的PH缓冲液需要考虑实验的具体需求和条件，以确保实验结果的可靠性和准确性。例如，在生物实验中，可能需要使用与生物体液pH值相近的缓冲液来模拟体内的环境；在环境监测中，可能需要使用能够抵抗环境变化影响的缓冲液来确保测量的稳定性。因此，正确选择和使用PH缓冲液对于确保实验和生产的成功至关重要。 pH计校准的正确顺序是:先用pH7.0缓冲溶液校准,再用pH4.0或pH10.0缓冲溶液校准。
2.配制方法：将Tris-HCl平衡苯酚与等体积的氯仿/异戊醇（24:1）混合均匀后，移入棕色玻璃瓶中4℃保存。10%(W/V)SDS组份浓度：10%(W/V)SDS配制量：100ml配制方法：1.称量10g高纯度的SDS置于100-200ml烧杯中，加入约80ml的去离子水，68℃加入溶解2.滴加浓盐酸调节pH值至3.将溶液定容至100ml后，室温保存。2NNaOH组份浓度：2NNaOH配制量：100ml配制方法：1.量取80ml去离子水置于100～200ml塑料烧杯中（NaOH溶解过程中大量放热，有可能使玻璃烧杯炸裂)。2.称取8gNaOH小心地逐渐加入到烧杯中，边加边搅拌。3.待NaOH完全溶解后，用去离子水将溶液体积定容至100ml。4.将溶液转移至塑料容器中后，室温保存。NHCl组份浓度：NHCl配制量：100ml配制方法：1.在ml的去离子水中加入ml的浓盐酸（N)，均匀混合。2.室温保存。5MNaCl组份浓度：5MNaCl配制量：1L配制方法：1.称取gNaCl置于1L烧杯中，加入约800ml的去离子水后搅拌溶解。2.加去离子水将溶液定容至1L后，适量分成小份。3.高温高压**后，4℃保存。20%(W/V)Glucose组份浓度：20%(W/V)Glucose配制量：100ml配制方法：1.称取20gGlucose置于100～200ml烧杯中，加入约80ml的去离子水后，搅拌溶解。2.加去离子水将溶液定容至100ml。PBS缓冲液中的磷酸盐和盐水可以维持实验体系的离子强度稳定。江苏EBSS缓冲液常用知识
为了避免PBS缓冲液对人体的负面影响,建议使用时遵循正确的使用方法和容器规格,避免长时间或过量使用。中国台湾DPBS缓冲液技术指导
三、缓冲液使用中的注意事项在实际工作中有些分析人员由于不大了解缓冲溶液的作用机理，当所配制和使用的缓冲溶液与规定的数值不相符时，为使缓冲溶液达到要求，就用盐酸或氢氧化钠等强酸、强碱进行调节,以为这样做可以使缓冲溶液尽快达到所需要的pH值，然而，结果却适得其反，这样的溶液pH值虽然调对了，可是它的缓冲体系却被破坏了，作用也就失去了，缓冲溶液一般都是由弱酸及其弱酸盐或是弱碱及其弱碱盐组成的一对共轭体。使用缓冲溶液的注意事项：不少缓冲溶液都含有易挥发组分，如，氨-氯化铵中的氨酷酸-醋酸钠中的醋酸。现在，不少实验室引入了定量加液器，用定量加液器加试剂，具有简便准确误差恒定的特点，特别是在做成批样品时更显出它的优越性，不少同志也喜欢用它来加缓冲液，但是，应注意缓冲液不能长久存放在定量加液器中，因该器皿不密闭，易造成氨的挥发（醋酸-醋酸钠缓冲液中的醋酸也同理），从而，导致溶液失效，正确的做法是缓冲液应适量配制，使用后及时密闭并置于低温中保存。中国台湾DPBS缓冲液技术指导
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