胰酶使用注意:1、在使用胰酶细胞消化液的过程中要特别注意避免消化液被细菌污染。2、胰酶细胞消化液消化细胞时间不宜过长,否则细胞铺板后生长状况会较差。胰酶配制方法:1、培养液配制,方便好用,对细胞影响小,并且培养液的ph值正好适合胰蛋白酶的溶解2、生理盐水配制,要先调ph值(①胰酶(1:250)②③④⑤⑥⑦Water1000mL磁力搅拌2-3小时,调,过滤除菌。)3、pbs(:称取胰酶粉末,先用少许灭菌过的PBS调成糊状,然后补足到100ml。置室温搅拌4小时或冰箱内过夜,过滤灭菌,分装,4℃保存备用。);或是hanks或是D-hanks液配制(1.称取胰蛋白酶粉末置烧杯中,先用少许D-Hanks平衡盐溶液()调成糊状,然后再补足D-Hanks平衡盐溶液,搅拌混匀,置室温4小时或冰箱过夜,并不断搅拌振荡;2.次日,先用滤纸粗滤,再进行过滤除菌,分装入瓶中,低温冰箱保存备用,常用浓度为。胰蛋白酶溶液偏酸,使用前可调用碳酸氢钠溶液调pH至。)一般,至于作用效果,需要消化一次细胞感觉一下,因为不同厂家的酶不一样,有的作用温和,有的作用剧烈。4、是否需要四度放置过夜,取决于你的胰酶的纯度。过去的胰酶纯度不高,所以难以溶解,需要四度过夜.而现在的胰酶纯度都很高。 EDTA是一种二价金属离子螯合剂,用于结合抑制胰蛋白酶活性的钙离子和镁离子。重庆EDTA胰酶采购
胰酶消化贴璧细胞原理胰酶是一种重要的消化酶,它在人体消化过程中起到了关键作用。胰酶主要由胰腺分泌,它能够帮助人体消化食物中的蛋白质、脂肪和碳水化合物等营养物质。而胰酶消化贴壁细胞则是指胰酶在消化过程中与肠道内的贴壁细胞发生作用的机制。胰酶消化贴壁细胞的原理主要包括胰酶的合成、分泌和作用三个过程首先是胰酶的合成。胰酶是由胰腺内的特殊细胞合成的。这些细胞受到胃内食物的刺激后,通过胰腺神经末梢的刺激而开始合成和分泌胰酶。合成的胰酶经过胰管进入小肠。接下来是胰酶的分泌。胰酶的分泌主要通过胰腺分泌液的产生和排泄来实现。当胃内食物通过幽门进入小肠后,小肠壁上的细胞会分泌一种叫做胃腺素的物质,这种物质能够刺激胰腺分泌液的分泌。胰腺分泌液中含有胰酶和其他消化酶,它们经过胰管进入小肠,与食物中的营养物质发生作用。***是胰酶的作用。胰酶主要通过两种方式作用于贴壁细胞。一种方式是直接作用,胰酶直接与贴壁细胞接触并发挥作用。另一种方式是间接作用,胰酶作用于食物中的营养物质,将其分解为小分子物质后再与贴壁细胞发生作用。 重庆EDTA胰酶采购胰酶细胞消化液(不含EDTA)消化细胞时间不宜过长,否则细胞铺板后生长状况会较差。
淡黄色的胰酶溶液能放心使用吗?能,对于胰酶呈黄色的问题,不同品牌也都对此现象进行了测试实验。变色的胰酶同样能很好的用于细胞的解离,请放心使用。细胞消化时,胰酶不去除对细胞的影响?细胞消化时,如果消化液中只有胰酶,不含EDTA,不去除是没有问题的。如果消化液中含有胰酶和EDTA,比较好去除。EDTA是一种化学螯合剂,主要作用在于能螯合Ca、Mg离子,使细胞分离。但EDTA不能被血清中和,消化后要彻底清洗去除,否则细胞易脱壁。胰酶胰酶和EDTA联合使用可提高消化效率,所以常二者合用。胰酶的保存
胰酶使用注意:1、在使用胰酶细胞消化液的过程中要特别注意避免消化液被**污染。2、胰酶细胞消化液消化细胞时间不宜过长,否则细胞铺板后生长状况会较差。贴壁细胞的消化:1、吸去培养液,用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清2、加入少量胰酶细胞消化液,略盖过细胞即可,根据胰酶效率差异可以增加惑减少胰酶用量。室温放置30秒至2分钟(不同的细胞消化时间有所不同)3、显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化呈白茫状;或者用***吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。4、此时吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验如果发现消化不足,则加入胰酶细胞消化液重新消化。如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落,直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g离心1分钟,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。常用的细胞消化液为胰蛋白酶(Trypsin),EDTA等,其功能主要是使细胞间的蛋白质(如细胞外基质)水解,改变细胞间的连接。胰蛋白酶溶液作为细胞分离试剂广泛应用于贴壁细胞的连续培养。
收藏查看我的收藏0有用+1已投票0胰蛋白酶编辑锁定本词条由“科普**”百科科学词条编写与应用工作项目审核。胰蛋白酶Trypsin(Parenzyme)为蛋白酶的一种,EC,是从牛、羊、猪的胰脏提取的一种丝氨酸蛋白水解酶。在脊椎动物中,作为消化酶而起作用。在胰脏是胰蛋白酶的前体胰蛋白酶原被合成后,作为胰液的成分而分泌,受肠激酶,或胰蛋白酶的限制分解成为活化胰蛋白酶,是肽链内切酶,它能把多肽链中赖氨酸和精氨酸残基中的羧基侧切断。它不仅起消化酶的作用,而且还能限制分解糜蛋白酶原、羧肽酶原、磷脂酶原等其它酶的前体,起活化作用。是特异性**强的蛋白酶,在决定蛋白质的氨基酸排列中,它成为不可缺少的工具。中文名胰蛋白酶英文名Trypsin别称胰酶化学式C6H15O12P3分子量≈24000CAS登录号9002-07-7EINECS登录号232-650-8[1]熔点115℃[1]水溶性易溶外观白色或类白色目录1生物制品简介▪物化性质2*典标准▪来源含量▪制法要求▪性状▪鉴别▪检查▪效价测定▪制剂3胰蛋白酶的医学检查▪检查名称▪分类▪胰蛋白酶的测定原理▪试剂▪操作方法▪正常值▪化验结果临床意义▪附注▪相关疾病4生物*品说明▪*理作用▪适应证▪禁忌证▪用法用量▪注意事项▪不良反应:▪**点评5其他。胰酶细胞消化液和胰蛋白酶消化液是一样的吗?重庆EDTA胰酶采购
胰酶在PH值7.2-8.0的时候,溶液呈淡红色。重庆EDTA胰酶采购
胰蛋白酶(Trypsin)简称胰酶,是一种丝氨酸水解酶,能把多肽链中赖氨酸和精氨酸残基中的羧基端切断。在组织细胞的提取、培养,以及体外细胞培养过程中,均会使用到胰蛋白酶消化液,用于水解细胞间蛋白质,使组织或细胞离散成单个细胞。胰酶在37℃pH8.0条件下消化能力**强。常用胰酶工作浓度为0.25%。EDTA可以螯合钙镁离子,胰酶溶液中搭配EDTA使用可以加速细胞间连接蛋白的水解,起到增强消化的效果。酚红是一种pH指示剂,溶液偏碱性时呈紫红色,偏酸性时呈橘红色,近中性时呈粉红色。本产品为0.25%胰蛋白酶消化液,含0.25%胰蛋白酶,溶于Hank’s缓冲液,不含EDTA,无酚红指示剂,经0.22μm过滤除菌。重庆EDTA胰酶采购
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