3.高温高压**后,4℃保存。SolutionI(质粒提取用)组份浓度:25mMTris-HCl(),10mMEDTA,50mMGlucose配制量:1L配制方法:1.量取下列溶液,置于1L烧杯中。2.高温高压**后,4℃保存。3.使用前每50ml的SolutionI中加入2ml的RNaseA(20mg/ml)。SolutionII(质粒提取用)组份浓度:200mMNaOH,1%(W/V)SDS配制量:500ml配制方法:1.量取下列溶液,置于500ml烧杯中10%SD50ml2NNaOH50ml2.加**水定容至500ml,充分混匀3.室温保存,此溶液保存时间比较好不要超过一个月注意:SDS易产生气泡,不要剧烈搅拌SolutionIII(质粒提取用)组份浓度:3MKOAc,5MCH3COOH配制量:500ml配制方法:1.称量下列试剂,置于500ml烧杯中。2.加入300ml去离子水后搅拌溶解。3.加去离子水将溶液定容至500ml。4.高温高压**后,4℃保存。MEDTA()组份浓度:MEDTA配制量:1L配制方法:1.称取gNa2EDTA·2H2O,置于1L烧杯中。2.加入约800ml的去离子水,充分搅拌。3.用NaOH调节pH值至(约20gNaOH)。注意:pH值至,EDTA才能完全溶解。4.加去离子水将溶液定容至1L。5.适量分成小份后,高温高压**。6.室温保存。1MDTT组份浓度:1MDTT配制量:20ml配制方法:1.称取gDTT,加入到50ml塑料离心管内。2.加20ml的MNaOAc()。每种缓冲体系所占的分量在各类细胞中是不同的.中国台湾DPBS缓冲液技术指导
从中选取包被抗体浓度和酶标抗体的稀释度。为了进一步节省试剂,可以此浓度为基点,缩小间距再进一步做棋盘滴定。?2测定方法的标准化?2.1加样?????ELISA中除了包被外,一般需进行96孔加样。定性测定中有时不强调加样量的准确性。例如规定为加样1滴,如不具备相当的条件,要尽量使用相同口径的滴管,保持准确的加样姿势,使每滴液体的体积基本相同。在定量测定中,加样量应力求准确,**好采用量程准确的微量移液器。加样时应将液体加在孔底,不要加在孔壁上部,避免出现气泡。?2.2保温?????在ELISA中,一般在加标本和结合物后,反应的温度和时间应按规定的要求,保温容器**好是水浴箱,可使温度迅速平衡。各ELISA板不应叠在一起。为避免蒸发,板上应加盖,或将板平放在底部垫有湿纱布的湿盒中。如用保温箱,空湿盒应预先放在其,以平衡温度。?2.3洗涤?????洗涤在ELISA过程中不是反应步骤,但却是决定实验成败的关键。在标本和结合物的稀释液和洗涤液中加入聚山梨酯一类物质即避免非特异性吸附,在ELISA中**为常用。ELISA板的洗涤一般可采用以下方法:吸干孑L内反应液;将洗涤液注满板孔;发表评论请自觉遵守互联网相关的政策法规,严禁发布***、**、反动的言论。宁夏DPBS缓冲液PBS缓冲液可以用于分子克隆和细胞培养等实验。
制备PBS缓冲液的方法制备PBS缓冲液非常简单,以下是制备1升10×PBS缓冲液的方法:13.将800ml的去离子水加入大容量烧杯中。14.将8g的氯化钠(NaCl)和0.2g的磷酸二氢钾(KH2PO4)加入烧杯中,用玻璃棒搅拌均匀。15.用去离子水将溶液补足至1升,继续搅拌至完全溶解。16.用盖子或保鲜膜覆盖烧杯,将烧杯放入冰箱中冷藏保存。注:若需要使用1×PBS缓冲液,只需取10×PBS缓冲液适量稀释即可。
制备PBS缓冲液的方法制备PBS缓冲液非常简单,以下是制备1升10×PBS缓冲液的方法:13.将800ml的去离子水加入大容量烧杯中。14.将8g的氯化钠(NaCl)和0.2g的磷酸二氢钾(KH2PO4)加入烧杯中,用玻璃棒搅拌均匀。15.用去离子水将溶液补足至1升,继续搅拌至完全溶解。16.用盖子或保鲜膜覆盖烧杯,将烧杯放入冰箱中冷藏保存。注:若需要使用1×PBS缓冲液,只需取10×PBS缓冲液适量稀释即可。
pH标准液如何正确使用及其主要作用
pH标准液是一种能使pH值保持稳定的溶液。如果向这种溶液中加入少量的酸或碱,或者在溶液中的化学反应产生少量的酸或碱,以及将溶液适当稀释,这个溶液的pH值基本上稳定不变,这种能对抗少量酸碱或大或稀释,而使pH值不变化的溶液就称为缓冲溶液。 pH标准液的如何正确使用: 1、复合电极不用时,可充分浸泡溶液中。切忌用洗涤液或其他吸水性试剂1/4浸洗。 2、使用前,检查玻璃电极前端的球泡。正常情况下,电极应该透明而无裂纹;球PH计标准液配制泡内要充满溶液,不能有气泡存在。 3、测量浓度较大的溶液时,尽量缩短测量时间,用后仔细清洗,防止被测液粘附在电极上而污染电极。 4、清洗电极后,不要用滤纸擦拭玻璃膜,而应用滤纸吸干,避免损坏玻璃薄膜、防止交叉污染,影响测量精度。 5.测量中注意电极的银一氯化银内参比电极应浸入到球泡内氯化物缓冲溶液中,避免电计显示部分出现数字乱跳现象。使用时,注意将电极轻轻甩几下。 如果加入的酸或碱量过多,缓冲溶液的缓冲能力会降低,pH值会发生变化。
淀粉酶活力的测定中缓冲液有什么作用
缓冲液1)缓冲溶液作用原理和pH值当往某些溶液中加入一定量的酸和碱时,有阻碍溶液pH变化的作用,称为缓冲作用,这样的溶液叫做缓冲溶液.弱酸及其盐的混合溶液(如HAc与NaAc),弱碱及其盐的混合溶液(如NH3·H2O与NH4Cl)等都是缓冲溶液.由弱酸HA及其盐NaA所组成的缓冲溶液对酸的缓冲作用,是由于溶液中存在足够量的碱A-的缘故.当向这种溶液中加入一定量的强酸时,H离子基本上被A-离子消耗:所以溶液的pH值几乎不变;当加入一定量强碱时,溶液中存在的弱酸HA消耗OH-离子而阻碍pH的变化.2)缓冲溶液的缓冲能力在缓冲溶液中加入少量强酸或强碱,其溶液pH值变化不大,但若加入酸,碱的量多时,缓冲溶液就失去了它的缓冲作用.这说明它的缓冲能力是有一定限度的. 在生物体中有三种主要的pH缓冲体系.西藏有酚红缓冲液哪个好
什么是缓冲溶液?请简述其在生物体中的作用。中国台湾DPBS缓冲液技术指导
PBS缓冲液的应用9.实验样品的洗涤:在分子生物学实验中,常常需要洗涤样品,去除杂质和不需要的物质。PBS缓冲液可以作为洗涤液,能够快速有效地洗涤样品,保持样品的纯净度。10.细胞培养:PBS缓冲液是细胞培养过程中不可或缺的一部分。在细胞培养过程中,经常需要将细胞从培养皿中取出或转移至其他容器中,PBS缓冲液可以用来洗涤细胞,保持细胞的完整性和活性。11.抗体染色:在免疫组化实验中,常常需要使用PBS缓冲液进行抗体的稀释和染色步骤。PBS缓冲液能够提供适当的离子环境,保持抗体的活性和稳定性。12.组织切片处理:在组织学实验中,组织切片处理是不可或缺的一个步骤。PBS缓冲液可以用于洗涤组织切片,保持切片的形态结构和稳定性。中国台湾DPBS缓冲液技术指导
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