[VIP第1年] 指数:3
若应用于植物培养中的液体培养基制作，可不用调节ph，用超纯水(ph为)充分溶解后定容，便可直接应用于大多数植物水培。培养实例1：哥伦比亚型拟南芥无菌苗培养(1)种子保存及消毒方法：a、拟南芥种子保存方法：哥伦比亚(col,columbia)型拟南芥种子成熟后，收取种子于，加入3-8颗变色**干燥剂，用封口膜密封后置于4℃长期保存；b、拟南芥种子**消毒方法：取出经低温干燥保存的种子，于无菌环境下，将适量种子置于无菌，加入适量体积的无菌水，将离心管颠倒几次后用低速离心机离心10s，小心倒掉上清，重复3次；加入75％酒精，将离心管颠倒几次后用低速离心机离心10s，小心倒掉上清；用无菌水清洗3次，低速离心10s后去除上清；加入适量体积的5％naclo溶液，将离心管上下颠倒10-20次，低速离心10s后倒掉上清，重复2次；用无菌水清洗3次，低速离心10s后去除上清；加入无菌水，使种子完全浸泡在无菌水中，于4℃放置48h后播种。在种子质量良好的情况下，利用上述方法保存及消毒的无菌拟南芥种子，萌发率极高且几乎同时出苗。(2)生长培养基配制：1/2cs基本培养基+蔗糖30g/l+植物凝胶8g/l，用超纯水溶解，。1/2cs基本培养基的成分及用量如表1所示。。减血清培养基减少了实验中血清带来的变异性。辽宁RPMI1640培养基哪家便宜
此法由巴斯德创立，用于酒类消毒而得名。目前用于牛乳消毒。方法有两种：一种为℃加热15秒，另一种为63-66℃加热30分钟。大多采用第一种方法。(2)煮沸法。在1个大气压下，水煮沸后温度达100℃，煮沸5分钟后可杀死一般**繁殖体。如于水中加入2%碳酸钠，可将其沸点提高至105℃，既可促进芽胞的杀灭，又可防止金属器皿生锈。(3)流通蒸气消毒法。又称常压蒸气消毒法，常用附诺(Amold)流通蒸气**器，利用1个大气压下100℃水蒸气进行消毒，10-30分钟后**繁殖体被杀死，但对芽孢作用不大。(4)间歇**法（fractionalsterilization）。采用间歇方式达到**目的。将**物品置于阿诺流通蒸气**器内，100℃加热15-30分钟，每日1次，连续3次。每次**后取出物品置37℃孵育箱过夜，致残存的芽胞发育成繁殖体，次日再通过流通蒸气**器加热而被杀灭。如此反复，既可杀灭芽胞，又可使不耐高温的物质免受影响。若某些物质不耐100摄氏度，则可将温度下降至75-80℃，每次加热时间延长到30-60分钟，常用血清凝固器对吕氏血清培养基和L-J培养基的**属此方法。(5)高压蒸气火菌法。利用密闭的耐高压蒸气**器(autoclave)，在蒸气不外溢的条件下，使锅内压力增高，随之蒸气温度也增高。通常在℃。辽宁RPMI1640培养基哪家便宜无酚红培养基在实验中减少了潜在毒性。
附图说明图1是1/2cs和1/2ms两种培养基上，哥伦比亚型拟南芥无菌苗培养的对比效果图，a：无菌苗在培养基中生长情况；b：无菌苗莲座叶及根系发育；c：萌发率；d主根长度；a和b中bar＝；图2是1/2cs和1/2ms两种培养基上，兰兹贝格型拟南芥无菌植株培养的对比效果图，a：无菌植株在培养基中生长情况；b：无菌植株地上部分及根系发育；c：无菌植株花***发育(左)和花粉的亚历山大染色(右)；d：主根长度；e：株高；f：莲座叶长度；g：成熟花粉活力；a中bar＝、b中bar＝、c中花***bar＝、c中花粉bar＝15um；图3是1/2cs和1/2ms两种培养基上，油菜无菌苗培养的对比效果图，a：无菌植株在培养基中生长情况；b：无菌苗地上部分及根系发育；c：茎高；d：茎中粗；e：主根长；f：大于；a中bar＝、b中bar＝；图4是1/2cs和1/2ms两种培养基上，马铃薯无菌苗培养的对比效果图，a：无菌植株在培养基中生长情况；b：无菌苗地上部分及根系发育；c：茎高；d：茎中粗；e：根数；a和b中bar＝；图5是cs和ms两种培养基上，哥伦比亚型拟南芥叶片及根愈伤**诱导的对比效果图，a：叶片愈伤**；b：叶片愈伤**诱导率；c：根愈伤**；d：根愈伤**诱导率；a和c中bar＝；图6是cs和ms两种培养基上。
C）大肠埃希菌＋＋－－产气肠杆菌－－＋＋志贺菌属－＋－－沙门菌属－＋－＋表硫化氢和尿素酶试验对肠杆菌属的鉴别试验伤寒沙门菌甲型副伤寒沙门菌变形杆菌志贺菌属大肠埃希菌克雷伯菌属硫化氢试验－/＋＋＋＋＋＋＋－－－尿素酶试验－－＋－－＋乳糖发酵试验－－－－＋＋在培养基中加入指示剂或某种化学物质**不需要的**生长，利于需要的**分离，这种培养基称为选择性培养基。常用的抑菌剂有胆盐、煌绿、玫瑰红钠、亚硒酸钠等。常用的指示荆有溴甲酚紫、溴麝香草酚蓝等。美蓝是氧化还原指示剂。例如，在培养基内加入青霉素可**革兰阳性**，而利于革兰阴性**的生长；如果加入链霉素，则可获得与加青霉素相反的选择效果；加入制霉素可*****，有利于**的分离。又如亚**铋琼脂，既能**革兰阳性**生长，又能**许多革兰阴性**生长，但伤寒沙门菌却能在这个培养基上生长出具有棕色环的菌落。SS琼脂是临床**检验中一种常用的选择性培养基。大肠埃希菌在SS培养基上，因发酵乳糖而产酸，使指示剂中性红变深，并使胆盐沉淀，所以菌落红色而不透明。沙门菌分解含硫氨基酸而产生硫化氢，硫化氢与枸橼酸铁形成硫化铁，所以菌落中心呈黑色。痢疾志贺菌，既不发酵乳糖也不产生硫化氧。减血清培养基提高了细胞培养的重复性和可靠性。
已发现当培养基中的血清浓度减少时，这些成分都是必需的。既使在使用血清的情况下，这些成分也可帮助细胞的克隆化培养及维持某些特殊细胞系的生长。***和生长因子在大多数常规培养基的配方中都没有注明，但在无血清培养基中通常要加入它们，用其来代替血清中的***能增加多种不同类型细胞的贴瓶率；生长因子包括FGF家族、EGF、PDGF、IGF－1和IGF－2及白介素等，生长因子和细胞因子有着***的特异性，一般与***或其它物质起相互协同或加成作用。另一种常见的添加物就是血清替代物，目前已有许多可完全或部分替代传统培养液中血清成分的商业产品，其稳定性较好，但批次间仍有差别，产品的成分也不很确定。干粉培养基原倍液的配制1）配制过滤**的细胞培养基(1)阅读培养基使用说明，确定需要添加何种添加剂（如NaHCO3、L-谷氨酰胺、**酸钠、HEPES等）。(2)根据所需将培养基全部倒入一容器中，用少量注射用水（20℃～30℃）将袋内残留培养基洗下，并入容器。加注射用水至总体积的95％，轻微搅拌溶解。(3)加入规定量的碳酸氢钠及所要添加的物质。(4)轻微搅拌溶解，加注射用水至规定体积。(5)用1mol/L氢氧化钠溶液或1mol/L盐酸溶液调pH至所需值。(6)用μm滤膜正压过滤**。。MEM培养基在细胞生物学研究中广泛应用。辽宁RPMI1640培养基哪家便宜
无血清培养基有助于维持细胞的纯净生长环境。辽宁RPMI1640培养基哪家便宜
如何正确地使用培养基及**大程度地保持培养基的营养以维持细胞的生长，对每个培养者都很重要。培养基的使用依不同的培养基种类、培养方式、细胞种类的不同而存在差异。细胞培养液的构成细胞培养液指细胞生长的液体环境，一般指完全培养液，添加了血清、水解乳蛋白、各种添加剂等可以直接使用的培养液。细胞培养基&血清模式血清对于在传统培养基配方中生长和增殖的大多数细胞系来说是需要的，因为大多数单独的培养基并不能提供细胞生长所需要的全部营养，如MEM培养基，较为常用的量为5％～10％的比例，而特殊的低血清培养基血清量可降至3％左右，细胞的形态和功能不受影响。细胞培养基&乳欧液模式化学合成培养基现虽已大规模使用，但在某些培养领域水解乳蛋白仍在使用，以补充培养液中缺乏的氨基酸、小肽物质。较为常用的方式是用汉氏（Hanks’BSS）或欧式(Earle’sBSS)平衡液溶解水解乳蛋白（一般为5‰浓度），即成乳汉（欧）液，再与化学合成培养基（一般为MEM）按比例混合使用（如1：1）。细胞培养基&各类添加剂（生长因子等）模式成分复杂的培养基还含有许多化合物，包括蛋白质、多肽、核苷、柠檬酸循环的中间产物、**酸及脂类等。辽宁RPMI1640培养基哪家便宜
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