[VIP第1年] 指数:3
所有操作均应在通风橱中进行，与苯酚接触过的皮肤部位应用大量水清洗，并用肥皂和水洗涤，忌用乙醇。3.苯酚平衡：因为在酸性pH条件下DNA分配于有机相，因此使用苯酚前必须对苯酚进行平衡使其pH值达到，苯酚平衡操作方法如下：①液化苯酚应贮存于-20℃，此时的苯酚呈结晶状态。从冰柜中取出的苯酚首先在室温下放置使其达到室温，然后在68℃水浴中使苯酚充分融解。②加入羟基喹啉（8-Quinolinol）至终浓度。该化合物是一种还原剂、RNA酶的不完全抑制剂及金属离子的弱螯合剂，同时因其呈黄色，有助于方便识别有机相。③加入等体积的1MTris-HCl（)，使用磁力搅拌器搅拌15分钟，静置使其充分分层后，除去上层水相。④重复操作步骤③。⑤加入等体积的MTris-HCl（)，使用磁力搅拌器搅拌15分钟，静置使其充分分层后，除去上层水相。⑥重复操作步骤⑤，稍微残留部分上层水相。⑦使用pH试纸确认有机相的pH值大于。⑧将苯酚置于棕色玻璃瓶中4℃避光保存。苯酚/氯仿/异戊醇(25:24:1)配制方法：1.说明：从核酸样品中除去蛋白质时常常使用苯酚/氯仿/异戊醇（25:24:1)。氯仿可使蛋白质变性并有助于液相与有机相的分离，而异戊醇则有助于消除抽提过程中出现的气泡。在生物体中有三种主要的pH缓冲体系.中国香港EBSS缓冲液常见问题
在前面提到，将等式同时取对数，并简化就可以得到： 或者这就是Henderson-Hasselbalch方程。值得注意的是，式子中酸及其共轭碱的浓度都是平衡时的浓度，除了酸性过于强的情况下，由于同离子效应的存在，一般都可用此式计算，根据此式可得出下列几点结论：1 缓冲液的pH值与该酸的电离平衡常数Ka及盐和酸的浓度有关。弱酸的pKa值衡定，但酸和盐的比例不同时，就会得到不同的pH值。酸和盐浓度相等时，溶液的pH值与PKa值相同。2 酸和盐浓度等比例增减时，溶液的pH值不变。3 酸和盐浓度相等时，缓冲液的缓冲效率为比较高，比例相差越大，缓冲效率越低，缓冲液的一般有效缓冲范围为pH=pKa±1,pOH=pKb±1。 [1]广东有酚红缓冲液产品介绍生化实验中加入缓冲液的目的和作用。
制备PBS缓冲液的方法制备PBS缓冲液非常简单，以下是制备1升10×PBS缓冲液的方法：13.将800ml的去离子水加入大容量烧杯中。14.将8g的氯化钠（NaCl）和0.2g的磷酸二氢钾（KH2PO4）加入烧杯中，用玻璃棒搅拌均匀。15.用去离子水将溶液补足至1升，继续搅拌至完全溶解。16.用盖子或保鲜膜覆盖烧杯，将烧杯放入冰箱中冷藏保存。注：若需要使用1×PBS缓冲液，只需取10×PBS缓冲液适量稀释即可。
制备PBS缓冲液的方法制备PBS缓冲液非常简单，以下是制备1升10×PBS缓冲液的方法：13.将800ml的去离子水加入大容量烧杯中。14.将8g的氯化钠（NaCl）和0.2g的磷酸二氢钾（KH2PO4）加入烧杯中，用玻璃棒搅拌均匀。15.用去离子水将溶液补足至1升，继续搅拌至完全溶解。16.用盖子或保鲜膜覆盖烧杯，将烧杯放入冰箱中冷藏保存。注：若需要使用1×PBS缓冲液，只需取10×PBS缓冲液适量稀释即可。
在缓冲溶液中加入少量强酸或强碱，其溶液pH值变化不大，但若加入酸，碱的量多时，缓冲溶液就失去了它的缓冲作用。这说明它的缓冲能力是有一定限度的。缓冲溶液的缓冲能力与组成缓冲溶液的组分浓度有关。0.1mol.L-1HAc和0.1mol.L-1NaAc组成的缓冲溶液，比0.01mol.L-1HAc和0.01mol.L-1NaAc的缓冲溶液缓冲能力大。关于这一点通过计算便可证实。但缓冲溶液组分的浓度不能太大，否则，不能忽视离子间的作用。组成缓冲溶液的两组分的比值不为1∶1时，缓冲作用减小，缓冲能力降低，当c（盐）/c（酸）为1∶1时△pH**小，缓冲能力大。不论对于酸或碱都有较大的缓冲作用。缓冲溶液的pH值可用下式计算：此时缓冲能力大。缓冲组分的比值离1∶1愈远，缓冲能力愈小，甚至不能起缓冲作用。对于任何缓冲体系，存在有效缓冲范围，这个范围大致在pKaφ（或pKbφ）两侧各一个pH单位之内。弱酸及其盐（弱酸及其共轭碱）体系pH=pKaφ±1弱碱及其盐（弱碱及其共轭酸）体系pOH=pKbφ±1例如HAc的pKaφ为4.76，所以用HAc和NaAc适宜于配制pH为3.76～5.76的缓冲溶液，在这个范围内有较大的缓冲作用。配制pH=4.76的缓冲溶液时缓冲能力比较大，此时（c（HAc）/c（NaAc）=1。PBS缓冲液的pH值为7.2-7.4，与人体血液等渗，可以维持实验体系的pH值稳定。
ph缓冲液的三个值
PH缓冲液的三个值指的是pH4、pH7和pH9。12PH缓冲液是一种能够维持溶液pH值相对稳定的化学物质，常用于科学实验和工业生产中。PH缓冲液的主要作用是抵抗外界酸碱物质的影响，保持溶液的pH值稳定。PH缓冲液的选择和使用对于确保实验结果的准确性和产品的质量至关重要。在科学实验中，PH缓冲液常用于校准pH计，确保测量的准确性。通过使用不同pH值的缓冲液进行校准，可以确保pH计在测量不同pH值的溶液时能够准确反映真实的pH值。此外，PH缓冲液还在生物化学、环境监测、食品工业等多个领域中发挥着重要作用。选择合适的PH缓冲液需要考虑实验的具体需求和条件，以确保实验结果的可靠性和准确性。例如，在生物实验中，可能需要使用与生物体液pH值相近的缓冲液来模拟体内的环境；在环境监测中，可能需要使用能够抵抗环境变化影响的缓冲液来确保测量的稳定性。因此，正确选择和使用PH缓冲液对于确保实验和生产的成功至关重要。 使用pH计可以更准确地测量pH值的变化，判断是否为缓冲溶液。广东有酚红缓冲液产品介绍
缓冲液的浓度会影响其缓冲能力。中国香港EBSS缓冲液常见问题
磷酸缓冲液的缓冲pH值范围非常***，可配置各种pH值的酸性、碱性和中性缓冲液，配制酸性缓冲液可直接用NaH2PO4或KH2PO4，pH范围在1-5；碱性缓冲液可直接用Na2HPO4或K2HPO4，pH范围在9-12；中性缓冲液则用等浓度的NaH2PO4和Na2HPO4或者等浓度的KH2PO4和K2HPO4溶液混合，pH在。通常所说的磷酸缓冲液的浓度是指溶液中含有的所有的磷酸根离子的浓度，而不是钠离子（Na+）或者钾离子（K+）的浓度。正是因为如此，在配制中性缓冲液时，用等浓度的NaH2PO4和Na2HPO4或者等浓度的KH2PO4和K2HPO4溶液混合，并不影响磷酸根离子的浓度，所得的缓冲液浓度仍是等浓度的NaH2PO4和Na2HPO4或者等浓度的KH2PO4和K2HPO4溶液原来的浓度，但是缓冲液中的钠离子（Na+）或者钾离子（K+）的浓度已经发生变化。 中国香港EBSS缓冲液常见问题
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