2.配制方法:将Tris-HCl平衡苯酚与等体积的氯仿/异戊醇(24:1)混合均匀后,移入棕色玻璃瓶中4℃保存。10%(W/V)SDS组份浓度:10%(W/V)SDS配制量:100ml配制方法:1.称量10g高纯度的SDS置于100-200ml烧杯中,加入约80ml的去离子水,68℃加入溶解2.滴加浓盐酸调节pH值至3.将溶液定容至100ml后,室温保存。2NNaOH组份浓度:2NNaOH配制量:100ml配制方法:1.量取80ml去离子水置于100~200ml塑料烧杯中(NaOH溶解过程中大量放热,有可能使玻璃烧杯炸裂)。2.称取8gNaOH小心地逐渐加入到烧杯中,边加边搅拌。3.待NaOH完全溶解后,用去离子水将溶液体积定容至100ml。4.将溶液转移至塑料容器中后,室温保存。NHCl组份浓度:NHCl配制量:100ml配制方法:1.在ml的去离子水中加入ml的浓盐酸(N),均匀混合。2.室温保存。5MNaCl组份浓度:5MNaCl配制量:1L配制方法:1.称取gNaCl置于1L烧杯中,加入约800ml的去离子水后搅拌溶解。2.加去离子水将溶液定容至1L后,适量分成小份。3.高温高压**后,4℃保存。20%(W/V)Glucose组份浓度:20%(W/V)Glucose配制量:100ml配制方法:1.称取20gGlucose置于100~200ml烧杯中,加入约80ml的去离子水后,搅拌溶解。2.加去离子水将溶液定容至100ml。在生物体中有三种主要的pH缓冲体系.贵州HBSS缓冲液价格信息
缓冲溶液的pH通常由酸的电离平衡常数Ka及盐和酸的浓度以及所在的环境、温度等因素来决定;4.75~7.25属于正常ph范围内。缓冲溶液是由弱酸及其盐、弱碱及其盐组成的混合溶液,能在一定程度上抵消、减轻外加强酸或强碱对溶液酸碱度的影响,从而保持溶液的pH值相对稳定。缓冲溶液的pH值在一定的范围内不因稀释或外加少量的酸或碱而发生***的变化,缓冲溶液依据共轭酸碱对及其物质的量不同而具有不同的pH值和缓冲容量。1、酸和盐浓度等比例增减时,溶液的pH值不变。2、酸和盐浓度相等时,缓冲液的缓冲效率为比较高,比例相差越大,缓冲效率越低。山东PBS缓冲液包括什么酶活性实验中缓冲液的作用。
1:50~l:800)后,按行进行包被、洗涤。按列分别加入用稀释液1:100稀释的强阳性、弱阳性、阴性参考血清及稀释液(作空白对照),保温,洗涤。加工作浓度酶标抗体,洗涤,加底物显色,加酸终止反应后读取A值。选择强阳性参考血清A值;为0.8左右,阴性参考血清A值<0.1的包被抗原稀释度为工作浓度。?方阵(棋盘)法选择包被抗体和酶标抗体的工作浓度将抗体用包被液稀释为10mg/L、lmg/L、/L三个浓度按行包被,每一个浓度包被三行(每行3孔),分别在每个浓度包被的***、二、三行中分别加入强阳性抗原,弱阳性抗原和阴性对照,将酶标抗抗体用稀释液稀释为1:l000、l:5000、l:10000三个浓度,分别加入每个浓度包被的***、二、三列中。加底物显色,加酸终止反应,分别读取A值。以强阳性抗原液A值在,阴性参考A值<**适条件。据此选择包被抗体和酶标抗体的**佳工作浓度。?二、ELISA**适工作浓度的选择及标准化操作1**适工作浓度的选择?1.1间接法测抗体?????酶标抗体工作浓度的选择:①用IgG进行包被,洗涤。②将酶标IgG用稀释液作一系列稀释后分别加入已包被的孔中,保温、洗涤。③加酸终止反应后,读取吸光度(A)。读取A值在1.0时的酶标抗体稀释度,作为酶标抗体的工作浓度。
制备PBS缓冲液的方法制备PBS缓冲液非常简单,以下是制备1升10×PBS缓冲液的方法:13.将800ml的去离子水加入大容量烧杯中。14.将8g的氯化钠(NaCl)和0.2g的磷酸二氢钾(KH2PO4)加入烧杯中,用玻璃棒搅拌均匀。15.用去离子水将溶液补足至1升,继续搅拌至完全溶解。16.用盖子或保鲜膜覆盖烧杯,将烧杯放入冰箱中冷藏保存。注:若需要使用1×PBS缓冲液,只需取10×PBS缓冲液适量稀释即可。
制备PBS缓冲液的方法制备PBS缓冲液非常简单,以下是制备1升10×PBS缓冲液的方法:13.将800ml的去离子水加入大容量烧杯中。14.将8g的氯化钠(NaCl)和0.2g的磷酸二氢钾(KH2PO4)加入烧杯中,用玻璃棒搅拌均匀。15.用去离子水将溶液补足至1升,继续搅拌至完全溶解。16.用盖子或保鲜膜覆盖烧杯,将烧杯放入冰箱中冷藏保存。注:若需要使用1×PBS缓冲液,只需取10×PBS缓冲液适量稀释即可。 什么是缓冲溶液?请简述其在生物体中的作用。
三、缓冲液使用中的注意事项在实际工作中有些分析人员由于不大了解缓冲溶液的作用机理,当所配制和使用的缓冲溶液与规定的数值不相符时,为使缓冲溶液达到要求,就用盐酸或氢氧化钠等强酸、强碱进行调节,以为这样做可以使缓冲溶液尽快达到所需要的pH值,然而,结果却适得其反,这样的溶液pH值虽然调对了,可是它的缓冲体系却被破坏了,作用也就失去了,缓冲溶液一般都是由弱酸及其弱酸盐或是弱碱及其弱碱盐组成的一对共轭体。使用缓冲溶液的注意事项:不少缓冲溶液都含有易挥发组分,如,氨-氯化铵中的氨酷酸-醋酸钠中的醋酸。现在,不少实验室引入了定量加液器,用定量加液器加试剂,具有简便准确误差恒定的特点,特别是在做成批样品时更显出它的优越性,不少同志也喜欢用它来加缓冲液,但是,应注意缓冲液不能长久存放在定量加液器中,因该器皿不密闭,易造成氨的挥发(醋酸-醋酸钠缓冲液中的醋酸也同理),从而,导致溶液失效,正确的做法是缓冲液应适量配制,使用后及时密闭并置于低温中保存。长时间或过量使用PBS缓冲液可能会对人体产生耐受性,导致恶心、呕吐、腹泻等症状。内蒙古EBSS缓冲液进货价
缓冲液的浓度会影响其缓冲能力。贵州HBSS缓冲液价格信息
生物缓冲液pH计校正及使用方法
生物缓冲液在实验分析中经常被用到,它的作用是稳定溶液的pH值。然而,很多人在实验中会遇到无法调节缓冲液pH值的情况,这是为什么呢?如何解决这个问题呢?下面我将详细介绍。首先,从目前使用的pH计来看,国产的pH计或酸度计,校正缓冲液时需要注意以下两种情况:
1、购买市场上配置好的标准溶液,在聚乙烯瓶中密封储存。如果在室温条件下保存1-2个月后,若出现浑浊、沉淀或发霉等情况,就不能继续使用了。已经使用过的校正缓冲液也不能再倒回去使用。2、购买缓冲剂并自己配置。大部分厂家生产的缓冲剂都是干燥型的pH缓冲剂,使用时需要将其溶解在之前煮沸15-30分钟的去离子水中,然后倒入250ml容量瓶中,稀释至刻度,充分摇匀即可。 贵州HBSS缓冲液价格信息
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