(含)英文名:(含)储存条件:-20℃产品简介:胰蛋白酶(Trypsin)是由胰脏产生没有活性的胰蛋白酶原分泌到小肠后,小肠内的肠肽酶会活化该酶原,形成胰蛋白酶。胰蛋白酶的特点在于已经活化的胰蛋白酶,能够继续活化更多胰蛋白酶原,这种过程即自动催化。胰蛋白酶在小肠工作,它会将蛋白质水解为肽,进而分解为氨基酸,其**适温度约为37℃。胰蛋白酶-碳酸氢铵溶液()由、除菌。本试剂可以直接用于培养细胞的消化,或者一些组织的消化,通常室温下1min左右就可以消化大多数贴壁细胞。使用说明(*供参考):1.贴壁细胞的消化①吸除培养液,用无菌PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次,去除残余的血清。②加入少量胰蛋白酶-碳酸氢铵溶液(),略盖过细胞即可,室温放置。(不同的细胞消化时间有所不同)③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用***吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。④如果发现消化不足,则加入胰蛋白酶-碳酸氢铵溶液()重新消化。⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落。 胰酶使用的时候要注意什么?陕西重组胰酶哪个好
胰蛋白酶广泛应用于食品加工、制药、生化检测和制革等多种行业。在制药工业中,胰蛋白酶可使天然蛋白、变性蛋白、纤维蛋白和黏蛋白等水解为多肽或氨基酸,以达到***的目的。胰蛋白酶生物药用于***呼吸道疾病,可以溶解黏痰和脓性痰,还可以***毒蛇咬伤等。由于血清中含有非特异性抑肽酶,故胰蛋白酶不会消化正常组织,而能分解脓性痰等黏性分泌物,促进***、化疗药物向病灶渗透。在食品工业中,胰蛋白酶主要用于水解价值较高的动植物性蛋白等,以牛乳为例,利用胰蛋白酶水解其中的酪蛋白、α-乳白蛋白和β-乳球蛋白等致敏原,能生产低敏配方奶粉。在制革工业中,胰蛋白酶用于皮革脱灰软化,也可以利用胰蛋白酶提取具有良好生物相容性和生物降解性的胶原蛋白。[1]陕西重组胰酶哪个好使用胰酶细胞消化液(不含EDTA)的过程中要特别注意避免消化液被细菌污染。
只断裂赖氨酸或精氨酸胰蛋白酶原的***过程的羧基参胰蛋白酶降解物分析与形成的肽键。白色或米黄色结晶性粉末。溶于水,不溶于乙醇、甘油、氯仿和**。分子量24000,pI,**适pH值~。pH>。Ca2+对酶活性有稳定作用;重金属离子、有机磷化合物、DFP、天然胰蛋白酶**剂对其活性有强烈**。临床用于抗消肿,工业上用于皮革制造、生丝处理、食品加工等。胰蛋白酶*典标准胰蛋白酶来源含量本品系自猪、羊或牛胰中提取的蛋白分解酶。按干燥品计算,每1mg中胰蛋白酶的活力不得少于2500单位。胰蛋白酶制法要求本品应从检*合格的牛、羊或猪胰中提取,生产过程应符合现行版《*品生产质量管理规范》的要求。胰蛋白酶性状本品为白色或类白色结晶性粉末。胰蛋白酶鉴别取本品约2mg,置白色点滴板上,加对甲苯磺酰-L-精氨酸甲酯盐酸盐试液,即显紫色。胰蛋白酶检查酸度取本品,加水溶解并制成每1ml中含2mg的溶液,依法测定(2010年版*典二部附录ⅥH),pH值应为~。溶液的澄清度取本品,加,依法检查(2010年版*典二部附录ⅨB),溶液应澄清。糜蛋白酶-底物溶液的制备取N-乙酰-L-酪氨酸乙酯,置100ml量瓶中,加磷酸盐缓冲液(取,混合,pH值为)50ml,温热使溶解,冷却后再稀释至刻度,摇匀。
使**或细胞片分散成单个细胞,制成细胞悬液用于进一步的实验。影响消化速度的因素较多,主要有胰酶溶液的活性(配制条件、冻存或4℃保存时间长短、是否反复冻融、化冻后存放时间及温度等)、消化时的温度(气温、细胞培养瓶及胰酶溶液的温度)以及所加胰酶溶液的多少等。加入胰蛋白酶-EDTA溶液,视细胞瓶的大小加入体积为2ml或更多(依培养器皿的大小而定),以使充分浸润;一般消化时间约为1至3分钟,肉眼观察瓶底由半透明(细胞单层连接成片)转为透明、点状(出现细小空隙)时,弃去细胞消化液,或看见培养瓶壁呈白茫状即可。并加入适量的完全培养液终止消化,吹打分散;如见大量细胞片状脱落,已消化过头,则不能顷倒消化液而直接进行下一步操作。(消化过头,可造成大量细胞从瓶壁上脱下,甚至造成细胞破碎。由于血清含有非特异性胰蛋白酶抑制剂,所以加入完全培养基可以终止反应。胰酶配置方法:1、培养液配制,方便好用,对细胞影响小,并且培养液的ph值正好适合胰蛋白酶的溶解2、生理盐水配制,要先调ph值(①胰酶(1:250)克②EDTA-Na③NaCl④KCl⑤Glucose⑥PhenolRed⑦Water1000mL磁力搅拌2-3小时,调pH,过滤**。)3、pbs(:称取胰酶粉末。消化液经过过滤除菌,可以直接用于培养细胞的消化,或者一些组织的消化。
细胞传代消化时所用胰酶的浓度越高是越好 贴壁细胞的消化: 常用的消化方法主要有酶消化法、离子螯合剂、物理法和冷冻法。其中**常用的是酶消化法。酶消化法:贴壁干细胞酶消化传代时通常采用两种方式:1、加入胰酶等干细胞脱落后,再加培养基中止胰酶作用,离心传代;2、加入胰酶后,镜下观察待干细胞开始脱落时,弃去胰酶,加入培养液并分瓶。但前者太麻烦,而后者有可能对干细胞施加胰酶选择,因为总是贴壁不牢的干细胞先脱落。胰蛋白酶溶液作为细胞分离试剂广泛应用于贴壁细胞的连续培养。陕西重组胰酶哪个好
EDTA是一种二价金属离子螯合剂,用于结合抑制胰蛋白酶活性的钙离子和镁离子。陕西重组胰酶哪个好
(不含EDTA含酚红)性质、用途与生产工艺背景胰酶又名胰醇素、胰液素。白色或淡黄色无定形粉末。系从各种动物胰脏制取的混合物,主要是蛋白酶、脂酶、淀粉酶。溶于水呈微浑溶液。不溶于醇、醚。有引湿性,遇酸、碱及热即丧失活力,水溶液遇酸、热、重金属或单宁酸时产生沉淀。为助消化药,用于缺乏胰液的***症。也用于皮革工业和纺织印染,主要用于酶法脱毛。将绞碎的猪胰浆经***、提取、沉淀、脱脂、干燥、粉碎而得。简介(不含EDTA含酚红)为细胞培养基,1.不含EDTA含酚红:含酚红,(1:250)溶于HBSS溶液,不含钙镁。-20℃保存。胰(不含EDTA含酚红)含,不含EDTA和酚红,溶于无钙镁平衡盐溶液中,经过滤除菌,可以直接用于培养细胞和组织的消化,通常室温消化2分钟左右就消化下大多数贴壁细胞。使用方法(不含EDTA含酚红)使用说明---贴壁细胞Chemicalbook的消化:a)吸去培养液,用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。b)加入少量胰蛋白酶消化液,盖过细胞即可,室温放置1-2分钟。不同的细胞消化时间有所不同,对于贴壁牢固的细胞可适当延长消化时间。c)显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化。 陕西重组胰酶哪个好
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